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鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟

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產(chǎn)品簡介

鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

〖CAS號〗：5486-84-0
C17H18N3O3Cl ? 1/2ZnCl2=415.94
〖級別〗：For microscopy
有效分光〖含量〗：≥35.0%
〖含量〗（以Zn計(jì)）：≥7.5%
吸光度試驗(yàn)：合格
薄層層析試驗(yàn)：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：淺米紅色或黃綠色粉末，對光敏感，〖熔點(diǎn)〗 157℃(分解)。zui大吸收波長 395nm
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定脂酶及堿性磷酸酶。用于顯微鏡
〖保存〗：-20℃，避光
固藍(lán)RR鹽
〖英文名稱〗：Fast blue RR salt；Azoicdiazo No.24；Diazonium salt of 4-benzoyl amino-2,5-dimethoxyaniline；4-Benzoylamino-2,5-dimethoxybenzene diazonium chloride hemi[zinc chloride]salt；4-Amino-2,5-dimethoxybenzanilide diazotated zinc double salt
〖其他名稱〗：重氮堅(jiān)牢藍(lán)；堅(jiān)牢藍(lán)RR鹽；重氮固藍(lán)RR；4-苯甲酰氨基-2,5-二甲氧基氯化重氮苯氯化〖鋅〗鹽；耐曬蘭RR鹽
〖CAS號〗：14726-29-5
C15H14ClN3O3?1/2ZnCl2=387.89
〖級別〗：BR

GAPDH 小鼠單抗   細(xì)菌 RNAout
植物 Actin 小鼠單抗   細(xì)菌蛋白酶抑制劑
植物 Actin 小鼠單抗   細(xì)菌膜蛋白質(zhì)微量提取試劑盒
組蛋白 3.1 小鼠單抗   細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒
組蛋白 3.1 小鼠單抗   蝦堿性磷酸酶
COX IV 兔單抗   *
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗   *溶液 ,100mg/mL
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗   纖連蛋白 ( 人血 )
小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗   纖維蛋白原
小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗   纖維二糖
小鼠抗 c-Myc 標(biāo)簽單抗   纖維素 DE-52
小鼠抗 c-Myc 標(biāo)簽單抗   纖維素酶
小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗   顯影定影套裝
小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗   顯影粉
小鼠抗 GST 標(biāo)簽單抗   線狀 DNA 清除劑
小鼠抗 GST 標(biāo)簽單抗   腺苷
小鼠抗 V5 標(biāo)簽單抗   腺苷脫氨酶
   小鼠 R