小鼠平足蛋白(PDPN)測定試劑盒
中文名稱：小鼠平足蛋白(PDPN)測定試劑盒
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠平足蛋白(PDPN)測定試劑盒水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標(biāo)記的結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的濃度。
洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。可以說在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液b.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時(shí)間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。（2）流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。
優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。
相關(guān)指標(biāo)：
人N-乙基馬來酰亞胺敏感因子(NSF)測定試劑盒Homo sapiens (Human) N-Ethylmaleimide Sensitive Factor (NSF)
人AMPA離子能*受體1(GRIA1)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1)
小鼠平足蛋白(PDPN)測定試劑盒
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)測定試劑盒Rattus norvegicus (Rat) Peroxisome Proliferator Activated Receptor Alpha (PPARa)
豬卵白蛋白(OVA)測定試劑盒General Ovalbumin (OVA)
人生長停滯DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白α(GADD45α)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Growth Arrest And DNA Damage Inducible Protein Alpha (GADD45a)
人硫酸肝素-2-O-磺基轉(zhuǎn)移酶1(HS2ST1)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Heparan Sulfate-2-O-Sulfotransferase 1 (HS2ST1)
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)測定試劑盒Rattus norvegicus (Rat) Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1)
人乙酰*酯酶(AchE)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Acetylcholinesterase (AchE)
小鼠*酶(GLS)測定試劑盒Mus musculus (Mouse) Glutaminase (GLS)
人受體相互作用**激酶1(RIPK1)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Receptor Interacting Serine Threonine Kinase 1 (RIPK1)
大鼠促卵泡素(FSH)測定試劑盒Rattus norvegicus (Rat) Follicle Stimulating Hormone (FSH)
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