顆粒培養(yǎng)基技術(shù)注意事項(xiàng)大匯總
1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 %ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。
2. 無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以 70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
3. 小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少 Class II)。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol 之產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭之傷害等。
5. 定期檢測下列項(xiàng)目： 5.1. CO2 鋼瓶之CO2壓力 5.2. CO2 培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。 5.3. 無菌操作臺內(nèi)之a(chǎn)irflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000 小時(shí)/HEPA)。
6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750)，定期更換水槽的水
請問工作濃度的*是不是應(yīng)保存在-20度?如果放在4度冰箱可以保存多久呢?是不是幾個(gè)小時(shí)就會失去活性?
平時(shí)放在-20度，分裝在50毫升螺口管，用時(shí)拿一管放4度用。
1. 認(rèn)真按照操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，一般不大會導(dǎo)致污染，很多情況下是由于所用的試劑或培養(yǎng)基有污染而使實(shí)驗(yàn)失敗，
2. 粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清)，一般在4度盡量不要超過1個(gè)月，如在-20度存放時(shí)間可長一些，但也不要超過3-4個(gè)月，可能對于永生化細(xì)胞株來說要求不是太高，但我在過去的4年里一直是作原代 細(xì)胞培養(yǎng) 的，細(xì)胞嬌弱，經(jīng)驗(yàn)表明放置時(shí)間不宜過長。
3. 關(guān)于實(shí)驗(yàn)用品的清洗與消毒，我的經(jīng)驗(yàn)是：用過的玻璃器皿先在清水中浸泡30min以上，然后加少許清洗劑，以超聲波洗滌30min左右，(如無超聲波洗滌器可用軟毛刷輕輕刷洗干凈)，撈出晾干，再在鉻酸洗液中浸泡6-18h(或過一夜)后，自來水清洗10-15遍，雙蒸水清洗3-4遍，晾干，高壓消毒后即可使用。
顆粒培養(yǎng)基大鼠toll樣受體1(TLR1)ELISA試劑盒 ，英文名： TLR1 ELISA Kit
大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIEG1 ELISA Kit
大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)ELISA試劑盒 ，英文名： TARDBP ELISA Kit
大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒 ，英文名： SDC1 ELISA Kit
大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)ELISA試劑盒 ，英文名： SHC1 ELISA Kit
大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 ，英文名： S-100 ELISA Kit
大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 ，英文名： S-100B ELISA Kit
大鼠S100B蛋白(S100B)ELISA試劑盒 ，英文名： S100B ELISA Kit
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)ELISA試劑盒 ，英文名： S100A5 ELISA Kit
大鼠Rho鳥苷酸交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)ELISA試劑盒 ，英文名： Arhgef7/Pak3bp/Pixb ELISA Kit
大鼠Ras相關(guān)C3肉毒素底物1(RAC1)ELISA試劑盒 ，英文名： RAC1 ELISA Kit
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒 ，英文名： P-Selectin/CD62P ELISA Kit
大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 ，英文名： SP-R ELISA Kit
大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 ，英文名： SP ELISA Kit
大鼠P53(P53)ELISA試劑盒 ，英文名： P53 ELISA Kit
大鼠P27蛋白(P27)ELISA試劑盒 ，英文名： P27 ELISA Kit
大鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 ，英文名： P21 ELISA Kit
大鼠P0蛋白(p0)ELISA試劑盒 ，英文名： p0 ELISA Kit
大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)ELISA試劑盒 ，英文名： AcSDKP ELISA Kit
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 ，英文名： NAG ELISA Kit
大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 ，英文名： NT-proBNP ELISA Kit
大鼠Na-K-ATP酶(Na-K-ATPase)ELISA試劑盒 ，英文名： Na-K-ATPase ELISA Kit
大鼠M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒 ，英文名： CKM ELISA Kit
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒 ，英文名： L-Selectin/CD62L ELISA Kit
顆粒培養(yǎng)基
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