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MUG培養基 用途原理及使用方法

閱讀:213發布時間:2018-11-29

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MUG培養基   用 途:

EC-MUG培養基用于多管發酵法測定生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌(GB/T5750.12-2006)。

原 理:

胰蛋白胨提供碳氮源;3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌,特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌;乳糖是可發酵的糖類;*和磷suaner氫鉀為緩沖劑;氯化鈉可維持均衡的滲透壓。大腸埃希氏桿菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

培養基配方(每升):

胰蛋白胨 20.0g

3號膽鹽 1.5g

乳糖 5.0g

* 4.0g

磷suaner氫鉀 1.5g

氯化鈉 5.0g

MUG 0.05g

終pH 6.9±0.2

使用方法:

1、稱取EC-MUG培養基37.05g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝于帶有小倒管的試管中,115℃高壓滅菌20min,待冷至常溫,備用。

2、將總大腸菌群多管發酵法初發酵產酸或產氣的管進行大腸埃希氏菌檢測。用燒灼滅菌的金屬接種環或無菌棉簽將上述試管中液體接種到EC-MUG肉湯管中。

3、將已接種的EC-MUG管在培養箱或恒溫水浴中44.5±0.5℃培養24h±2h。如使用恒溫水浴,在接種30min內進行培養,水浴箱的液面應高于EC-MUG肉湯液面。

4、觀察結果:將培養基管置366nm紫外燈下約5cm處,以未接種培養物的EC-MUG培養基作空白對照,觀察有無藍白色熒光。空白對照管應無藍白色熒光,試驗管出現藍白色熒光為陽性反應。


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