1.產品名稱:小鼠膀胱移行上皮細胞實驗方法
2.組織來源:膀胱組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠膀胱上皮細胞分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,位于骨盆內,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環形肌,形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:①組成過濾屏障內壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細胞和上皮細胞,進而影響腎臟病變。
本公司的小鼠膀胱移行上皮細胞采用*-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa
人血小板反應蛋白/*敏感蛋白1
人血漿α顆粒膜蛋白
人末端補體復合物C5b-9
人補體蛋白4
人補體蛋白3
人*Ⅱ
人類白細胞抗原B27
人結合珠蛋白/觸珠蛋白
人血清總補體
人過敏毒素/補體片斷4
人補體片斷5a
人補體片斷3a
人*Ⅷ相關抗原
人*Ⅸ
人*Ⅹ
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子
人纖溶酶抗纖溶酶復合物
人*抗*復合物
人抗*受體
人*受體
人第八因子相關抗原
人血纖蛋白原
人主要組織相容性復合體Ⅰ類
人抗*Ⅲ抗體
人血栓前體蛋白
人淋巴細胞功能相關抗原3
人主要組織相容性復合體Ⅲ類
人主要組織相容性復合體Ⅱ類
人載脂蛋白A1
人載脂蛋白B100
人白血病抑制因子受體
*A
*G
*M
人纖溶酶原激活物抑制因子1
人纖溶酶原激活物抑制因子
人血纖蛋白原降解產物
人血栓調節蛋白
人血小板衍生生長因子
人血小板活化因子
人組織型纖溶酶原激活劑
人組織因子
人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白
人血小板因子4
人淋巴細胞功能相關抗原2
人白三烯E4
人D二聚體
*E
人髓系細胞觸發受體-1
Anti-CYP2E1/FITC 熒光素標記抗細胞色素P450ⅡE1抗體IgG 0.2ml
Anti-CYP3A4/FITC 熒光素標記抗細胞色素P450 3A4抗體IgG 0.2ml
Anti-CYP8A1/PTGIS/FITC 熒光素標記前列環素合成酶抗體IgG 0.2ml
Anti-CYP19/FITC 熒光素標記細胞色素P450 19抗體IgG 0.2ml
Anti-CYP21/FITC 熒光素標記21-羥化酶抗體IgG 0.2ml
Anti-Cyr61/FITC 熒光素標記富半*肝素結合蛋白61IgG 0.2ml
Anti-Cytochrome C/FITC 熒光素標記細胞色素 C抗體IgG 0.2ml
Anti-Cytochrome P450 2C19/CYP2C19 /FITC 熒光素標記細胞色素P450 2C19抗體IgG 0.2ml
Anti-Cytochrome P450 2C9/CYP2C9 /FITC 熒光素標記細胞色素P450 2C9抗體IgG 0.2ml
Anti-Cytochrome P450 2D6/CYP2D6 /FITC 熒光素標記細胞色素P450 2D6抗體IgG 0.2ml
Anti-CK1/8/19(Cytokeratin 1/8/19)/FITC 熒光素標記細胞角蛋白抗體1/8/19IgG 0.2ml
Anti-DRD1 receptor/FITC 熒光素標記多巴胺受體-D1抗體IgG 0.2ml
Anti-DRD2 receptor/FITC 熒光素標記多巴胺受體-D2抗體IgG 0.2ml
Anti-DRD3 receptor/FITC 熒光素標記多巴胺受體-D3抗體IgG 0.2ml
Anti-DRD4 receptor/FITC 熒光素標記抗多巴胺受體-D4抗體IgG 0.2ml
Anti-DRD5 receptor/FITC 熒光素標記抗多巴胺受體-D5抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化Disabled 1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化Disabled 1抗體IgG 0.2ml