細胞名稱 雜交瘤細胞;A3C實驗方法
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
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操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
周期素L抗體 Cyclin L
補體C1RL鏈多肽抗體 C1RL
周期素M2抗體 Cyclin M2
周期素T2抗體 Cyclin T2
周期素K抗體 Cyclin K
抗菌肽CAMP抗體 Cathelicidin
5號染色體開放閱讀框4抗體 C5ORF4
4號染色體開放閱讀框44抗體 C4orf44
4號染色體開放閱讀框33抗體 C4orf33
4號染色體開放閱讀框42抗體 C4orf42
5號染色體開放閱讀框33抗體 C5ORF33
9號染色體開放閱讀框89抗體 C9orf89
19號染色體開放閱讀框66抗體 C19orf66
21號染色體開放閱讀框55抗體 C21orf55
21號染色體開放閱讀框70抗體 C21orf70
胱抑素A/半*蛋白酶抑制劑A抗體 Cystatin A
8號染色體開放閱讀框4抗體 C8orf4
CD73抗體 CD73
軸突相關粘附分子抗體 CNTN4/AXCAM
6型膠原蛋白α5抗體 COL6A5
神經細胞粘附分子CALL抗體 CHL1
中性粒細胞殺菌蛋白BP30抗體 CAP57
21號染色體開放閱讀框56抗體 C21ORF56
T淋巴細胞CD1抗體 CD1A
細胞角蛋白5抗體 Cytokeratin 5
補體C9a抗體 Complement component C9a
20號染色體開放閱讀框141抗體 C20ORF141
20號染色體開放閱讀框160抗體 C20orf160
親環蛋白(親環素)40抗體 Cyclophilin 40
T細胞調控相關蛋白抗體 CRTAM
突觸后蛋白CRIPT抗體 CRIPT
鈣粘附蛋白8抗體 Cadherin 8
6號染色體開放閱讀框174抗體 C6orf174
6號染色體開放閱讀框150抗體 C6orf150
X染色體開放閱讀框56抗體 CXorf56
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Ai-Langerin/CD207/FITC 熒光素標記白細胞分化抗原CD207抗體IgG 細胞甘油三酯(triglyceride)含