線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于檢測線粒體的健康狀態,也是用來檢測細胞早期凋亡的常用方法。
JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針。JC-1染料表現出電勢依賴性的積聚在線粒體內。正常線粒體內,JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物,聚合物發出強烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去J化程度也可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。
線粒體膜電勢的破壞是細胞凋亡早期發生的一個標志性事件。細胞受到凋亡誘導后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發生改變。膜通透性的增加,使得線粒體蛋白包括細胞丨色素丨C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內切酶G(EndoG)、凋亡誘導因子(AIF)等從線粒體基質釋放到細胞漿。細胞丨色丨素C的釋放伴隨膜電位的*喪失,進而引發細胞凋亡酶的級聯效應。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID系列線粒體膜電位檢測試劑盒——用一種陽離子染料測量線粒體膜電位,根據膜電位狀態發出綠色或橙色的熒光。在有能量的細胞(膜電位較高)中,染料在細胞質中以綠色熒光單體存在,同時在線粒體中以橙色熒光聚集體的形式聚集。然而,在線粒體膜電位受損的細胞(膜電位較低)中,染料主要以綠色熒光單體存在于整個細胞質中,在線粒體中不再表現出橙色熒光。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 線粒體膜電位檢測試劑盒特點:
比JC-1熒光染料靈敏10倍,水溶性好;
耐光雙發射染料;
無需漂洗/換液過程;
單獨的MITO-lD測定可用于檢測線粒體質量;
在較低的藥物/劑量濃度下檢測細胞毒性;
沒有像JC-1配方那樣的溶劑偽影。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 線粒體膜電位檢測試劑盒的應用:
左圖:HeLa細胞的線粒體用 MITO-ID 膜電位染料染色,并通過落射熒光顯微鏡觀察。橙色熒光聚集體定位于線粒體(橙色通道),而綠色熒光單體主要染色細胞質(FITC通道)。
右圖:對照組和處理組細胞的流式細胞術分析。Jurkat細胞未經處理(左),用1μM CCCP處理15分鐘(右)。然后用MITO-ID 膜電位染料對細胞進行染色,并在FACS Calibur儀器上運行。
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