組織解離/原代細胞分離和細胞收獲是酶在組織培養研究和細胞生物學研究中的主要應用。  盡管多年來在這些應用中廣泛使用酶，但它們在解離和收獲中的作用機制尚不清楚。  因此，選擇一種技術而不是另一種技術通常是武斷的，并且更多地基于過去的經驗，而不是對方法為何有效以及哪些修改可以帶來更好結果的理解。

Worthington 艾美捷細胞分離程序的目標是J大限度地提高功能上可行的解離細胞的產量。  有許多參數可能會影響任何特定程序的結果，包括但不限于：

1.   組織類型

2.   原產地物種

3.   動物的年齡

4.   基因改造（基因敲除等）

5.   使用的解離介質

6.   使用的酶

7.   使用的任何粗酶制劑中的雜質

8.   所用酶的濃度

9.   溫度

10. 孵化時間

前四項通常不是選擇問題。 為了獲得合適的結果，還是根據經驗定義其他變量條件。

研究人員在科學文獻中搜索有關理想酶和組織解離的最佳條件的信息時，經常會遇到相互矛盾的數據。  大部分變化源于細胞外基質的復雜性和動態性，以及在細胞分離應用中使用相對粗糙、不確定的酶制劑的歷史。  此外，細胞外基質由多種蛋白質、糖蛋白、脂質和糖脂組成，所有這些物質的豐度因物種、組織和發育年齡而異。  常用的粗酶制劑如 Pronase、NF 1:250 和膠原酶含有多種濃度不同的蛋白酶，以及多種多糖酶、核酸酶和脂肪酶。

本指南總結了我們關于這些酶如何完成組織解離和細胞收獲的“常規"操作的知識，描述了標準實驗室程序，提供了建立細胞分離方案的合乎邏輯的實驗方法，并列出了許多組織特異性參考文獻。

關于Worthington 艾美捷組織解離常見的部分問題解答：

1.什么是膠原酶 (CLS) 可接受的酶稀釋劑？

膠原酶可以直接溶解在pingheng鹽溶液或選擇的緩沖液中。它應該通過 0.22um 孔徑的膜進行無菌過濾。其適合pH范圍為7-9。

2.新生兒心肌細胞分離系統（NCIS 試劑盒）可以用于成人嗎？

NCIS 試劑盒專門為五個獨立的組織解離而包裝，每個包含多達十二個新生大鼠心臟。成年大鼠心肌細胞通常需要灌注，即。Langendorf 灌注系統和II 型膠原酶。

3.Worthington 艾美捷Hank's、Earle's 和 Leibovitz L-15 Media 的數量是多少？

NCIS（新生兒心肌細胞分離系統）試劑盒中提供無菌不含鈣和鎂的 Hank pingheng鹽溶液。

NCIS 套件還包含一袋 Leibovitz L-15 Media Powder。將袋中的全部內容物重新溶解到含有 800 毫升細胞培養級水的燒杯中。用額外的 100 毫升沖洗糞便 2-3 次。使總體積達到 1 升并通過 0.22 微米孔徑的過濾器過濾。裝有 1 升 Leibovitz L-15 Media 粉末的袋子是目錄號LK003250。

Worthington專注于生物技術和生命科學研究，診斷，生物制藥和生物加工應用的高質量純化酶，蛋白質，核酸和試劑盒。其核心酶包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，yi蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。