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細(xì)胞分離研究丨Worthington梭菌蛋白酶方案

時(shí)間:2022-7-21閱讀:72
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梭菌蛋白酶(內(nèi)蛋白酶-Arg-C背景:

梭菌蛋白酶是一種半胱丨氨酸激活的蛋白酶,與膠原酶和其他蛋白酶一起存在于溶組織梭菌的培養(yǎng)濾液中。它對精丨氨酸的羧基肽鍵的特異性及其對硫醇和鈣離子的依賴性是du特的。

 

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艾美捷Worthington梭菌蛋白酶特異性

梭菌蛋白酶以較低的速率選擇性地水解精氨酰鍵和賴氨酰鍵。它還可以作為轉(zhuǎn)肽酶,在 pH 7.6-9.0 時(shí)具有最大活性(Anderson 1985,以及 Fortier 和 MacKenzie 1986)。

 

艾美捷Worthington梭菌蛋白酶分子特征:

重鏈和輕鏈均由具有 1581 個(gè)核苷酸開放閱讀框 (ORF) 的單個(gè)基因編碼。基因表達(dá)后,整個(gè) ORF(信號區(qū)、前區(qū)和 個(gè)氨基酸肽接頭)被轉(zhuǎn)錄。翻譯后加工產(chǎn)生異二聚體活性酶(Dargatz  et al.  1993)。  

 

活化劑:

巰基要求:二硫蘇糖醇、半胱丨氨酸或其他還原劑

鈣離子是bi不可少的

還原劑

 

抑制劑:

乙二胺四乙酸

氧化劑

巰基試劑(如 TLCK)(Porter et al. 1971

Co 2+Cu 2+Cd 2+和重金屬離子

檸檬酸鹽、硼酸鹽和 Tris 陰離子部分抑制

 

艾美捷Worthington梭菌蛋白酶5個(gè)應(yīng)用

1.肽圖

2.序列分析

3.細(xì)胞分離 (Wang et al. 2004)

4.酰胺鍵的水解/縮合

5.肽合成 (Meiwes et al. 1991)

 

相關(guān)文獻(xiàn):

1.Gilles, A.Imhoff, J. 和 Keil, B.: 梭菌蛋白酶高活性形式的化學(xué)特性、活性和硫醇含量 , J Biol Chem 254 , 1462, 1979

2.Gilles, A.Lecroisey, A. 和 Keil, B.:α-梭菌蛋白酶輕鏈的初級結(jié)構(gòu) , Eur J Biochem 145 , 469, 1984

3.Homandberg, G.、 Komoriya , A. 和 Chaiken, I.: 非結(jié)合肽片段的酶促縮合使用分子阱 , 生物化學(xué) 338533851982

 

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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