艾美捷Worthington核酸酶、微球菌背景:
微球菌核酸酶催化 DNA 和 RNA 的切割以產生 3'-核苷酸。它具有外切和內切 5'-磷酸二酯酶活性。該酶在富含腺苷酸或尿苷酸和脫氧腺苷酸或胸苷酸的位點催化 RNA 和 DNA 的優先內切水解。該酶的分子量為 16,807 道爾頓,并且依賴于鈣。最佳 pH 值為 9.2,但會根據存在的離子鈣濃度而變化。
單位定義:一個單位對應于在 37°C、pH 8.0、260 nm 處光密度變化 1.0,使用 DNA 作為底物。
艾美捷Worthington核酸酶、微球菌相關研究:
白蛋白,無核酸酶 (BSANF)
脫氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
E•RASE RNase A/T1 Blend (RCT)
組蛋白 (H, NHL)
核酸酶,S1 ( SINUC/SINUCL)
核酸、DNA、大腸桿菌、λ/片段、RNA
磷酸酶、堿性 (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)
磷酸二酯酶 I (VPH)
磷酸二酯酶 II (SPH)
蛋白酶 K (PROK/PROKS)
反向轉錄酶,重組 HIV (RTHIV)
核糖核酸酶 A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)
核糖核酸酶 T1,無動物源 (RT1S)
艾美捷Worthington核酸酶、微球菌測定:
方法:基本上是 Heins等人所描述的。(1966) 基于核酸酶消化 DNA 后酸溶性寡核苷酸的釋放。一個單位對應于在 37°C 和 pH 8.0 在指丨定條件下在 260 nm 處的 1.0 光密度變化。
試劑:
0.1 M 硼酸鈉,pH 8.8
0.01 M 氯化鈣
DNA,2.5 mg/ml:將 25 mg Worthington 小牛胸腺 DNA 溶解在 10 ml 0.01 M NaCl 中制備。在室溫下靜置過夜,然后緩慢攪拌以產生溶液。
7% 高氯酸
0.1% 牛血清白蛋白
酶:
以 1 mg/ml 溶解在試劑級水中。在 0.1% 白蛋白中稀釋至 0.001-0.002 mg/ml 用于測定。
方程
程序:
如下移液器進入 5 個編號的試管中的每一個:
0.1 M 硼酸鈉,pH 8.8 0.1 毫升
0.01 M CaCl 2 0.05 毫升
0.25% DNA 0.1 毫升
在 37°C 水浴中孵育 6-7 分鐘以達到溫度平衡。在 0.001-0.0002 mg/ml 范圍內制備至少四種不同的酶稀釋液。每隔一段時間,將 0.1 ml 適當稀釋液移入相應的試管中,并在水浴中更換。向作為空白的第五個添加 0.1 ml 0.1% 白蛋白。孵育 30 分鐘。通過添加 0.5 ml 7% 高氯酸以定時間隔停止反應。將試管置于冰浴中 10 分鐘,然后加入 2.7 ml 試劑級水。在臨床離心機上以最高速度離心 15 分鐘。抽出上清液并讀取 A 260與空白對照。
注意:為獲得最佳結果,應稀釋樣品以使最終 A 260介于 0.2-0.9 之間。
Worthington主要研究覆蓋生物技術和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質量純化酶,蛋白質,核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,智慧城市網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。