關于艾美捷worthington細胞分離優化技術,主要包含一般準則、優化策略和細胞定量、生存能力測量這四個方面。那么接下來一起看看一般準則的詳細攻略吧~
艾美捷worthington優化技術:一般指南
盡管針對特定細胞類型的細胞分離程序的優化取決于具有各種所需特性的細胞的充分回收,但可以建立一些指導方針。本指南中有關細胞分離和所用酶的信息,結合邏輯和適當的實驗設計,應能開發出令人滿意的細胞分離方法。(有關詳細討論,請參見 Freshney 1987。)
圖1:細胞產量和活力之間的復雜關系可以通過左側顯示的簡化圖示來表示。一般來說,在產量和生存力之間存在平衡的優化回收區域;在該范圍的中間附近工作將減少細胞分離過程結果的可變性。了解這種關系以及它如何隨特定細胞類型和應用而變化,可以使優化過程更容易。
圖2:出于故障排除的目的,艾美捷worthington列出了各種可能的結果以及建議的糾正措施。請記住,象限之間沒有明確的界限,而是具有可變重疊區域的會聚區域。
1.低產量/低活力:過度/欠解離,細胞損傷。改用較少消化的酶和/或降低工作濃度。(例如從yi蛋白酶到膠原酶/從 2 型膠原酶到 1 型)。
2.低產量/高活力:解體下。增加酶濃度和/或孵育時間并監測產量和活力反應。如果產量仍然很低,請評估更易消化的酶和/或添加輔助酶。
3.高產量/低活力:解離性好,細胞損傷。酶過度消化和/或工作濃度過高。減少濃度和/或孵育時間并監測產量和活力響應。
嘗試通過添加牛血清白蛋白 (BSA) (0.1 - 0.5% w/v) 或大豆yi蛋白酶抑制劑 (0.01 - 0.1% w/v) 來稀釋蛋白水解作用。嘗試使用較少的蛋白水解酶,盡管產量可能會受到影響并應進行監測。
4.高產量/高活力:考慮評估解離參數的影響,以了解它們的局限性以供將來參考。
Worthington專注于高質量純化酶,蛋白質,核酸和試劑盒。其核心酶產品包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,yi蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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