預染蛋白Marker是一些純化好的蛋白混合物,通過與染料共價耦聯,在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白分子量的出現方便了實驗,可以幫助我們在電泳時、電泳后以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率。由于預染蛋白Marker是與染料共價耦聯,所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發生某些變化,可能導致一些偏差,所以不太適合精確定位蛋白。
不過多數情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白完-全一樣,我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小,最后都需要Western來定性,所以如果不是要區分大小相近的條帶,預染Marker還是很好用的,而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。
艾美捷Bio-Helix IRIS11預染蛋白質Markers(11條預染條帶,3-260 kDa)是11種預染色蛋白的組合,分子量為3至260kDa。11種重組蛋白與藍色發色團共價偶聯,而2條70kDa的紅色帶15kDa的綠色帶和60kDa的新設計的孔雀綠色帶用作參考帶。
IRIS11預拉伸蛋白質階梯跟蹤SDS聚丙烯酰胺過程中蛋白質的大小和分離凝膠電泳、近似靶蛋白大小并驗證PVDF上的蛋白質轉移效率,尼龍或硝化纖維膜。
艾美捷Bio-Helix IRIS11預染蛋白Markers組分:
IRIS11 Prestained Protein Ladder 500μl x 1 vial
艾美捷Bio-Helix IRIS11預染蛋白Markers存儲緩沖區:
0.2~0.4 mg/ml的每一條蛋白質儲存在含有:20 mM三磷酸鹽的溶液混合物中pH 7.5時,2%十二烷基硫酸鈉、0.2mM二硫蘇糖醇、3.6M尿素和15%(v/v)甘油。
參考各種電泳條件下的IRIS11預拉伸蛋白質梯形圖:
重要注意事項:
每種蛋白質的分子量(kDa)在每種電泳條件,應考慮其他數據以進行更準確的調整。
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