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豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒說明書
閱讀:96 發(fā)布時間:2019-7-26豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:
英文名稱:Porcine epidemic diarrhea virus antibodies (PEDV) ELISA kit
貨號:KS17806
規(guī)格:96T/48T
使用范圍:科研范圍內(nèi)使用
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等…
保存條件:2-8℃
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒注意事項
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
KS16309 牛血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)ELISA試劑盒
KS16310 牛血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
KS16311 牛嗅素4(OLFM4)ELISA試劑盒
KS16312 牛雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒
KS16313 牛雄烯二醇(AED)ELISA試劑盒
KS16314 牛心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒
KS16315 牛心肌肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒
KS16316 牛心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA試劑盒
KS16317 牛纖維蛋白原(Fg)ELISA試劑盒
KS16318 牛纖維蛋白原(Fb)ELISA試劑盒
KS16319 牛纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒
KS16320 牛纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒
KS16321 牛細(xì)胞色素b245重鏈(CYBB)ELISA試劑盒
KS16322 牛細(xì)胞角蛋白211片段(CYFRA211)ELISA試劑盒
KS16323 牛胃動素(MTL)ELISA試劑盒
KS16324 牛*原A(PGA)ELISA試劑盒
KS16325 牛*依賴蛋白S(PROS)ELISA試劑盒
KS16326 牛*(VD)ELISA試劑盒
KS16327 牛*(VC)ELISA試劑盒
KS16328 牛*12(VB12)ELISA試劑盒
KS16329 牛*(VA)ELISA試劑盒
KS16330 牛蛙生長激素(GH)ELISA試劑盒
KS16331 牛唾液酸(SA)ELISA試劑盒
KS16332 牛褪黑素(MT)ELISA試劑盒
KS16333 牛銅鋅過氧化物岐化酶(Cu/ZnSOD)ELISA試劑盒
KS16334 牛甜菜堿同型半*S甲基轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)ELISA試劑盒
KS16335 牛天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)ELISA試劑盒
KS16336 牛胎球蛋白B(FETUB)ELISA試劑盒
KS16337 牛胎盤生長因子(PGF)ELISA試劑盒
KS16338 牛羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒
KS16339 牛髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)ELISA試劑盒
KS16340 牛髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
KS16341 牛酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)ELISA試劑盒
KS16342 牛松弛肽(RLN)ELISA試劑盒
KS16343 牛雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
KS16344 牛嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒