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麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒實驗操作

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產品名稱:麥胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA試劑盒
產品規格:96T/48T
保存條件:2-8℃
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。

實驗原理:
WGA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。已知WGA濃度的標準品,未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將WGA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A,B和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中WGA的濃度呈比例關系。

 


實驗操作注意事項:
1、試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2、加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免第1孔與后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性;一般加樣時間控制在10分鐘內,如果樣本數量過多,可使用多道移液器。
3、孵育:樣品要在密閉的容器內進行孵育,嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4、洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響后的酶標儀讀數。
5、反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。
6、建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
7、建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商聯-系,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。

結果判斷
1、30分鐘內在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、以OD值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3、根據樣品的OD值查找對應的濃度范圍;

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