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網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)操作步驟

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產品名稱:網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)
分類:結締染色
規格:5X50ml
用途:網狀纖維染色,可區分膠原纖維
注意事項:見光易分解,使用前恢復至室溫,網狀纖維呈黑色。該法為改良型,省略調色等色步驟。
儲存條件:4℃,避光,3個月

簡介:
網狀纖維(Reticularfiber)是網狀結締組織內的一種纖維,由網狀細胞所產生,直徑多在0.2~1.0μm,有韌性而沒有彈性。網狀纖維的染色方法很多,但染色原理基本一致,大都采用氨銀浸法。改良Gomori網狀纖維染色原理是利用氨銀液易被組織吸附與組織的蛋白質結合,經甲醛還原成黑色或棕黑色的金屬銀,沉積于組織內及其表面。傳統方法中還原后先采用氯化金調色,再用硫代硫酸鈉溶液洗去組織上未還原的銀鹽,本改良法省略該步驟,使網狀纖維對比得更清晰。

網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)主要經過氧化、漂白、媒染、浸銀、還原步驟,與改良Gordon-Sweets法不同之處在于后者采用酸性氧化劑和核固紅復染液。冰凍切片、低溫切片和火棉膠切片均可用于網狀纖維染色,各種固定液均可采用,重金屬汞鹽或鋨鹽固定液偶爾會產生一些非特異性銀背景。網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)常用于鑒別腫瘤的性質和來源、癌與肉瘤、淋巴肉瘤與網狀細胞肉瘤、血管內皮瘤與血管外皮瘤、骨尤文瘤與骨網狀細胞肉瘤、腦膜瘤與星形細胞瘤、惡性神經鞘瘤及早期浸潤癌等。


操作步驟:
1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規脫水包埋。
2、切片厚4μm,常規脫蠟至水。
3、把切片平置在染色架上,滴加Gomori氧化劑,氧化5min。
4、稍水洗
5、入草酸溶液漂白1~2min。
6、流水沖洗2min,蒸餾水稍洗。
7、硫酸鐵銨溶液媒染5min。
8、稍水洗,蒸餾水稍洗。
9、滴加網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)染色3min。
10、蒸餾水稍洗。
11、Gomori還原劑還原1min。
12、流水沖洗10min。
13、常規脫水透明,中性樹膠封固。


注意事項:
1、玻璃器皿必須用洗滌液浸泡1天,自來水沖洗干凈,蒸餾水沖洗2次。
2、10%福爾馬林固定液是較為適合的固定液,不宜采用含汞的固定劑如Zenker液,否則易導致切片非特異性沉淀。
3、網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法)不太穩定,對光的敏感性強,應4℃避免保存,恢復至室溫后使用。

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