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637次產品名稱:GUS染色液(即用型)
規格:50ml/100ml
分類:植物染色
儲存條件:—20℃,避光,6個月
用途:用于轉基因植物的GUS基因表達的簡易檢測。
注意事項:染色原理是適宜的反應條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍色物質,該物質不溶解于轉基因的細胞核組織中的靛藍物質,具有GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。
簡介:GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細菌基因組內的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶,該基因常作為融合標記用于植物轉基因分析和調控研究中。GUS受體基因系統有表達E.coli GUS酶的穩定性和在植物內的低活性
GUS染色液(即用型)又稱β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)簡稱為GUS染色液,其染色原理是適宜的反應條件下β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍色物質,該物質不溶解于轉基因的細胞核組織中的靛藍物質,具有GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液可用于生物化學活性分析、免疫分析以及組織和細胞的組織化學染色,多用于轉基因植物的GUS基因表達分析,該即用型試劑比常規GUS染色液操作簡便。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、配制X-Gluc溶液(50x):取1ml X-Gluc Solution*加至1支X-Gluc中,充分溶解,即獲得X-Gluc溶液(50x)。配制好的X-Gluc溶液(50x)-20℃保存,1個月有效。
2、配制X-Gluc染色液:該染色液最好現用現配,短期貯存可以4℃保存3天。
3、取適量待染葉片等組織加入適量GUS染色液,使GUS染色液*浸沒組織。
4、37℃孵育,隨著孵育時間的延長,藍色漸漸出現,當表達量較高時,GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點。
5、用乙醇脫去樣本的葉綠素,一般樣本浸沒于乙醇1~3h,至陰性對照呈白色。如有必要可重復該脫色步驟,以便*清除葉綠素。樣本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光學顯微鏡下觀察,白色背景上的藍色即為GUS表達位點。
注意事項:
1、 配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3天。
2、 由于組織特異性等原因,藍色顏色反應可能不*一致,應注意摸索具體實驗條件。擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗根就可直接染色;煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉須在染色前切成薄片(1-3mm);當操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞,建議采購常規GUS染色液。
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