中文名:小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒
英文簡稱:(PDGF-BB)elisa kit
試劑盒配置:96T/48T
試劑盒內有:酶標包被板、酶標試劑、標準品等
elisa試劑盒保存:2-8℃。
試劑盒有效期:6個月
檢測目的:通過標準曲線計算樣品血清,血漿及相關液體樣本中的含量
elisa試劑盒有哪些種屬:豚鼠、兔子、人、小鼠、犬、雞、羊、豬、牛、大鼠、馬、猴、各類植物等
試劑盒用于:實驗室研究使用。
實驗時,建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。在實驗過程中,為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。實驗結束后,未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)elisa檢測原理優點:操作簡單、快速、敏感性高、特異性強、實驗設備要求簡單、應用范圍廣泛、無放射性污染、能定性及半微量、微量、超微量定量分析,是目前應用廣,發展快的酶免疫學技術方法。
實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
1、吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
① 固相載體:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
② 包被抗體(或抗原):將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
③ 酶標記抗體工作濃度:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
④ 酶的底物及供氫體:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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