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人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒技術(shù)參考

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中文名稱:人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒
英文名稱:Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit
供應(yīng)商:古朵生物
規(guī)格:48T/96T
包裝:T25培養(yǎng)瓶
儲(chǔ)存溫度:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))
有效期:6個(gè)月
1-2個(gè)工作日發(fā)貨,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),收到標(biāo)本起一周內(nèi)提供原始數(shù)據(jù)和終數(shù)據(jù)

 


ELISA各種樣本收集、處理、保存方法
1.血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2h或4℃過(guò)夜,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2.血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3.尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
4.唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。

5.細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
(2)細(xì)胞裂解液
收集細(xì)胞培養(yǎng)液,4℃、3000rpm/min離心20min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min,除去細(xì)胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。

6.植物標(biāo)本收集、處理、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5g),用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,PH7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05mol/LTris-HCl,pH7.4PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機(jī)器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000rpm/min離心20min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
7.糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法:
采集時(shí)用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
8.組織標(biāo)本收集、處理、保存方法:
將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,PH7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量小)。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=1:9)加入預(yù)冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時(shí)置于冰上。吸取勻漿液到離心管中,4℃、10000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。


人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒 操作說(shuō)明:
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。


試劑盒靈敏度、精密度、穩(wěn)定性:
1.靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽(yáng)性檢出的能力。
2.特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。其越高說(shuō)明特異性越好。
3.精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍
4.穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲(chǔ)存的時(shí)間,一般采用破壞性試驗(yàn)即將試劑存放于37℃保存,定期測(cè)定其靈敏度,特異性和精密度等指標(biāo),直到其質(zhì)量指標(biāo)開(kāi)始下降為止,通常認(rèn)為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個(gè)半月。
5.簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,在定性試驗(yàn)中結(jié)果判斷簡(jiǎn)單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單。
6.安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性。
7.經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。
試劑評(píng)價(jià):需要有的確證方法確證的樣品進(jìn)行檢測(cè),一般實(shí)驗(yàn)室不易取得此類樣品,每新購(gòu)進(jìn)一次試劑評(píng)價(jià)也很麻煩。可以通過(guò)間接的回收實(shí)驗(yàn)對(duì)試劑進(jìn)行選擇,若試驗(yàn)效果不好,請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照,保留未用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)xi我公司ji術(shù)支持為你解決問(wèn)題。

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