HTRF（均相時間分辨熒光，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence ）技術快速、穩定、不需洗滌、操作簡單、易于自動化和微型化，其作為藥物研發領域的技術，并廣泛用于信號轉導研究和免疫檢測。該技術已經在醫藥公司、生物技術公司和學術研究機構應用了15年以上。

HTRF介紹
HTRF（均相時間分辨熒光，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence ）是用來檢測純液相體系中待測物的一種常用方法。該技術結合了熒光共振能量轉移（FRET，Fluorescence Resonance Energy Transfer）和時間分辨熒光（TRF, Time-Resolved Fluorescence）兩種技術。HTRF是基于TR-FRET的化學技術，擁有與其它TR-FRET技術相似的特征，HTRF技術的能量供體（Donor）和能量受體（Acceptor）具有非常長的半衰期，很大的Stroke's shift等。HTRF數據分析方面，有來自于能量供體和能量受體的兩個發射光，可采用Cisbio的比值法來分析數據，從而去除由于溶液通透率、細胞大小、細胞數量等不同引起的誤差。

HTRF技術的優勢
操作非常簡單  實驗過程不需要繁瑣的洗板，只需要混勻孵育后檢測
體系非常穩定 穴狀化合物非常穩定，可耐受較寬的pH范圍、二價金屬離子、螯合物等，并且可以在至少48小時內反復多次檢測
數據真實可靠  背景低，受到樣品的干擾非常少，假陽性假陰性均低，尤其可去除由于天熱產物自發熒光等引起的干擾
應用靈活多樣  HTRF可以看作是不需洗滌的ELISA，應用范圍很寬
易于實現微型化，通量高

HTRF應用解決方案
HTRF技術從產生以來，已經被廣泛應用于免疫檢測和細胞信號轉導的研究，在藥物研發中被應用于不同的階段，從實驗方法的建立、高通量篩選（HTS），lead到hit，一直到臨床前研究。HTRF技術非常靈敏而且穩定，可以進行細胞實驗和生化實驗，并且可以使用384和1536孔板。HTRF的很多應用是基于抗體的檢測，包括GPCR（受體配體結合，受體二聚化，cAMP 和IP-1 的檢測，以及磷酸化ERK和AKT的定量）、激酶、細胞因子和生物標志物、生物過程（治療性抗體和蛋白藥物的生產）等，以及蛋白和蛋白、蛋白和多肽、蛋白和DNA/RNA相互作用的研究。HTRF具有與ELISA同等的檢測范圍和檢測極限，但是它不需要洗板，可以極大地減少實驗時間，所以HTRF技術可以取代大部分ELISA實驗，為均相ELISA。

G蛋白偶聯受體的解決方案
HTRF技術可用來進行第二信使檢測、胞內信號分子檢測和受體配體結合檢測方案，從而從幫助您進行G蛋白偶聯受體的研究。

HTRF激酶檢測解決方案
HTRF KinEASETM利用標記了鑭系元素Eu3+的特異性磷酸化位點的單抗以及XL665標記的鏈霉親和素跟生物素化的底物形成夾心實驗。整個實驗包含兩步：
酶反應步驟:激酶在有或者沒有化合物的條件下跟特異的底物混合，加入ATP起始反應。
檢測步驟:加入用檢測緩沖液配置的單抗-Eu3+和XL665，在檢測緩沖液中含有EDTA，因此能夠終止激酶反應。以上兩種檢測試劑可以先混合以減少加樣步驟。

HTRF細胞因子檢測
HTRF細胞因子檢測是基于雙抗體夾心法，包括兩個單克隆抗體（MAb）：銪標記的抗細胞因子抗體MAb1和XL665標記的抗細胞因子抗體MAb2。MAb1和MAb2分別與細胞因子結合，發生能量共振轉移，產生熒光信號，熒光信號與細胞因子的濃度成正比。

HTRF生物過程和抗體藥物研發解決方案
在治療性抗體的研發和篩選過程中，通常需要經過以下步驟：首先基于生物化學結合反應，利用HTRF或ELISA技術從幾千至上萬的樣本庫中篩選目標候選樣本。在確定候選樣本可以與表面受體結合后，進一步從細胞水平確定候選樣本與細胞的結合能力。隨后，確定候選樣本的Kd，Kon/off 和 IC50值，對抗體藥物的親和力等特性進行確定，后一步是進行抗體藥物的功能試驗，如抗體藥物激活細胞表面受體后，cAMP和IP-One的表達水平等等