影響酪胺的多重?zé)晒?IHC 實(shí)驗(yàn)成功的因素有很多。

一抗?jié)舛龋?/span> 多重小圖中每種一抗的最佳稀釋度必須憑經(jīng)驗(yàn)確定，并且通常可能與制造商建議的稀釋度存在很大不同，因?yàn)槔野烦恋頃?huì)引起熒光信號(hào)擴(kuò)增。我們強(qiáng)烈建議使用中等強(qiáng)度的熒光團(tuán)對(duì)每種組分進(jìn)行滴定，來優(yōu)化多重檢測(cè)板的個(gè)別組分。

順序優(yōu)化： 優(yōu)化對(duì)組織切片應(yīng)用多重小圖中的抗體順序，以確保多輪加熱不會(huì)損壞靶標(biāo)特異性表位，這點(diǎn)非常關(guān)鍵。我們建議使用中等強(qiáng)度的熒光團(tuán)來檢測(cè)多重檢測(cè)板每個(gè)窄縫中的所有優(yōu)化一抗，以確保熒光信號(hào)不受檢測(cè)板內(nèi)相對(duì)位置的影響。

抗體-熒光團(tuán)配對(duì)： 通常，使用最亮的熒光團(tuán)檢測(cè)表達(dá)低的靶標(biāo)來配對(duì)抗體，這是一種很好的做法。我們建議檢測(cè)由優(yōu)化的一抗組成的基質(zhì)和每種可用的熒光團(tuán)，以獲得檢測(cè)板上每種靶標(biāo)的最佳信號(hào)強(qiáng)度和信噪比。