不同動物elisa試劑盒如何進行校準?

　　造成動物elisa試劑盒檢測數據不一樣的原因，除了一些實驗操作、實驗環境等客觀因素外，還有試劑盒質量參數，如重復率、板內差、板間差、線性稀釋、回收率等。

　　但是，重要的影響因素可能是作為檢測標尺的標準品。接下來，通蔚生物就揭曉影響不同elisa試劑盒檢測數據的差異和關于標準品的幾個疑惑。

　　一、不同的動物elisa試劑盒如何進行校準?

　　1、國際標準物進行校準：目前，elisa試劑盒比較好的校準方法為應用NIBSC/WHO推薦的標準品對試劑盒進行校準。

　　2、高質量的原料進行校準：elisa試劑盒的檢測指標種類可能遠遠多于NIBSC/WHO推薦的標準品，有時需要依靠高質量的elisa試劑盒原料。

　　目前，進口原料依然是生產高質量elisa試劑盒的前提條件之一，但是不同品牌的蛋白表達體系和質控標準不同，可能會導致原料的性能不同，進而造成檢測數據的差異。

　　3、嚴謹的生物樣本進行驗證：隨著國內生物技術的發展，自主研發蛋白表達、抗體制備、elisa試劑盒開發技術也在不斷進步。

　　除了應用NIBSC/WHO推薦的標準品對試劑盒進行校準外，也可用一些暫無機構認可的生物樣本進行驗證，按照科學研究方法，對種屬、性別、生命周期階段、種類等因素劃分所得到的生物樣本進行驗證。

　　二、elisa試劑盒的標準品如何使用?

　　如果動物elisa試劑盒的標準品是重組蛋白，請提前20-30分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫(18-25℃)，如果試劑盒需分多次使用，請僅取出本次實驗所需的酶標板條和試劑，剩余板條和試劑需按照條件保存。

　　標準品工作液的配制：將標準品的凍干粉末盡量集中到西林瓶或離心管底部，加入標準品/樣品稀釋液至凍干標準品中，室溫水平靜置10分鐘，讓重組蛋白恢復其空間構象，然后上下顛倒數次，待其充分溶解后，輕輕混勻，避免起泡，然后進行分裝和使用即可。

　　標準品的保存和棄用：如果1個月內使用，動物elisa試劑盒標準品可以暫存于4℃;如果1個月以上不用，標準品必須保存于-20℃以下環境;已配制好的標準品工作液如有剩余液體請切記要棄用，標準品工作液一定要現配現用。

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