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Elisa方法陽性對照品和陰性對照品區別
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照:陰、陽性對照若有正確的結果,對試劑盒操作的結果可以有粗略的判斷。
空白對照:對ELISA試劑來說,空白對照實際上是不加標本不加酶做對照。空白對照主要測系統的吸光率。空白對照在單波長測量時顯得尤其重要;
Q1:什么是陽性、陰性對照做實驗時的陽性對照組或者陰性對照組是什么意思什么時候要設陽性對照,什么時候設陰性
A1:這個是根據實驗組來講的;
般要求實驗組可能出現某種結果,這個你應該明白吧陽性對照即是100%出現該結果的“實驗"組,材料是確定的;
陰性對照則是肯定不會出現結果的“實驗組",材料也是確定的;之所以加引號,是因為除了實驗需要驗證的變量,其他條件全部都是一樣的,用來排除其他實驗情況對結果產生的影響
例如,驗證一轉基因玉米是否有抗藥性,需要選擇同種的轉基因成功的抗藥玉米做陽性對照,無轉基因的做陰性對照從而保證除了該基因其他條件一致;
成功的實驗,通常情況下必須有陽性對照和陰性對照排除其他干擾情況
Q2:質粒轉化的陽性和陰性對照是什么
A2: 陽性對照:確定連接產物已經轉化到感受態細胞中 將感受態細胞進行鋪板陰性對照: 僅僅將感受態細胞進行鋪板
陽性對照品(positive control)和陰性對照品(negative control)是檢驗試驗有效性的控制品,同時也作為判斷結果的對照,因此對照品,特別是陽性對照品的基本組成應盡量與檢測標本的組成相一致.以人血清為標本的測定,對照品也為人血清,因為正常人血清在各種ELISA模式中可產生不同程度的本底.由于大量正常人血比較難得到,elisa試劑盒國外試劑盒中的對照品多以復鈣人血漿(recalcified human plasma)為原料,即在血漿中加入鈣離子,使其中的纖維蛋白質凝固,除去凝塊后所得的液體,其組成與血清相似.陰性對照品須先行檢測,確定其中不含待測物質.例如HBsAg檢測的陰性對照品中不可含HBsAg,抗HBs也是陰性.陽性對照品多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質,其中加入一定量的待檢物質,此量在試劑說明書中標明.加入的量應與試劑的敏感度相稱,在測定中得到的吸光值與受檢標本吸光值比較,可對標本中受檢物質的量有一個粗略的估計.ELISA試劑盒國外檢測HBsAg的檢測敏感度約為0.5ng/ml,陽性對照品中含量約為10ng/ml.在對照品中一般加入抗生素(antibiotic)和防腐劑,以利保存.
ELISA試劑盒定量測定的(例如甲胎蛋白質癌胚抗原測定等)應含有制作標準曲線用的參考標準品,應包括覆蓋可檢測范圍的4-5個濃度,一般均配入含蛋白保護劑及防腐劑的緩沖液中. ELISA試劑盒陰性對照及陽性對照:陰 陽性對照若有正確的結果,對試劑盒操作的結果可以有粗略的判斷.空白對照:對ELISA試劑來說,空白對照實際上是不加標本不加酶做對照.空白對照主要測系統的吸光率.空白對照在單波長測量時顯得尤其重要.
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