Elisa實(shí)驗(yàn)：ELISA的原理和類型

　　ELISA的原理

　　ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度

　　ELISA的類型

　　ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：(1)固相的抗原或抗體，即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為“酶聯(lián)物"、“結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型：

　　雙抗體夾心法測抗原

　　雙抗原夾心法測抗體

　　間接法測抗體

　　競爭法測抗體

　　競爭法測抗原

　　捕獲包被法測抗體(經(jīng)典方法)

　　ABS-ELISA法

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