ELISA實驗結果不顯色的原因及實驗中如何防止產生氣泡

　　ELISA實驗結果不顯色是什么原因導致：

　　有很多一些新手ELISA試驗人員來說，試驗做得不理想是難免的事。這不，就在近期一個朋友找古朵生物小編咨詢。這位朋友說道：“初次用間接法做ELISA試驗，做了幾回結果都沒有顯色，原因在哪里呢"

　　可能原因有這幾個方面：

　　1.包被原：包括你的包被液有無問題，有沒有配錯。包被原一般加100微升，37度2小時;

　　2.關閉：關閉液用的是否合適?你說做了幾回都沒顯色，空白孔也不顯嗎?假如空白也無色彩，那關閉就沒有問題。一般關閉是200微升每孔，也能夠滿孔關閉

　　3.一抗：查看你的一抗是否失效。是否是在37度反響

　　4.二抗：底物，底物緩沖液……這些都要好好查看!

　　5.洗刷：用PBST洗刷，包被和關閉時洗板3次;一抗二抗洗刷5次，每次間隔3分鐘。手工和機器洗刷沒什么不同，就是省力一些。洗5次不會有負影響，在一抗和二抗洗刷過程中，恰恰需求多洗幾回，這樣有助于削減非特異性吸附。

　　ELISA試驗中如何防止產生氣泡：

　　一般氣泡都是集合在酶標板的孔周圍，導致孔中液體不能與孔壁有用觸摸，使孔內反響不均一。

　　包被時有氣泡的話，將導致包被不實踐包被量下降--弱陽性乃至假陰性。

　　關閉時有氣泡的話，將導致很多未結合位點的存在，引起非特異性結合--本底增高，假陽性。

　　加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性。

　　加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有用的結合--弱陽性乃至假陰性(競爭法相反----假陽性)。

　　加顯色液時有氣泡的話---顯色不。

　　加停止液時有氣泡的話，1。不能停止反響 2。影響酶標儀比色，OD值增高

　　洗刷時有氣泡的話，非特異性結合物不能洗去，做無用功。

　　防止辦法：

　　1。加樣時盡量接近孔底(不要觸摸孔底)，用力均勻，不要過快過猛。

　　2。關閉時一定要加滿孔，

　　3。洗刷時一定要加滿孔(重要)，氣泡會浮上來zui終驅除。手藝洗板時一定要吸干水分并用力拍干。

　　ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒