RT-PCR代測服務：逆轉錄聚合酶鏈反應（Reverse transcription PCR，RT-PCR），是將RNA的反轉錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，利用變性，退火和延伸多步驟、多循環來擴增目的DNA片段。在該反應過程中，目的DNA產量呈指數增長，使一些極為微量RNA樣品檢測成為可能。與其他RNA分析技術如，Northern印跡、RNase保護分析、原位雜交及S1核酸酶等相比，RT-PCR具有更靈敏、便捷、價廉、易于操作等多重優勢，已成為初步檢測基因轉錄水平差異變化的實驗方法之一，廣泛應用于細胞基因表達、RNA病毒含量測定和克隆特定基因的cDNA序列等諸多方面。

RT-PCR代測服務基本步驟：
● 模板制備：RNA抽提。
● 引物合成：客戶提供上、下游引物，或者我公司提供免費的引物設計及合成（包括RT-PCR半定量檢測中的內參引物）。
● 反轉錄為cDNA
● PCR擴增
● 產物經瓊脂糖電泳后進行灰度掃描分析

RT-PCR代測服務服務須知：
1. 您可自備引物，亦可委托我們設計合成（費用由客戶承擔）。自備引物必須是PAGE純化的高質量的干粉，我們不接受已溶解的引物。
2. 樣本要求：盡可能新鮮
3. 樣本量：組織樣本，質量≥150mg；細胞樣本，細胞數≥1×107。
4. 我公司不接受您提供的RNA樣品，除非您有足夠的證據證明所提供的RNA沒有問題。
5. 服務時限和內容：收到樣本之日起20-30個工作日內提交實驗結果，具體包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、圖片及相關分析數據等；
6.報告送達：實驗結果將以電子或書面形式提交給您。

RT-PCR代測服務樣本制備及注意事項:
1.懸浮細胞： 懸浮細胞培養液倒入離心管中，離心沉淀細胞，棄去上清液。加入1ml PBS懸浮細胞，轉入小離心管中，低速離心沉淀細胞，棄去PBS，將細胞沉淀（1×107個細胞）放入-70℃ 冰箱保存。干冰運輸。也可以在細胞沉淀中加入1ml的 Trizol 裂解液反復吸打幾次，目視可見細胞層溶解*后，-70℃保存效果更佳。
2.貼壁細胞：取大約1×107個貼壁細胞，胰酶消化后加入PBS懸浮細胞，低速離心收集，棄去液體，加入 1 ml PBS懸浮細胞，轉入小離心管中，低速離心沉淀細胞，棄去PBS，放入-70℃冰箱保存。干冰運輸。也可以在細胞沉淀中加入1ml的 Trizol 裂解液反復吸打幾次，目視可見細胞層溶解*后，-70℃保存效果更佳。
3.組織：采集新鮮組織（注意：生物體死亡后1分鐘內取材料并保存好），組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈，切為小塊，放入液氮或-70℃冰箱中保存，干冰運輸。也可每 50-100 mg 組織加1 ml Trizol溶液勻漿裂解組織樣品。勻漿的裂解液4℃ 短期保存（1個月）。-20℃或-70℃長期保存。

RT-PCR代測服務特別提醒：
1.因RNA易出現降解，建議將標本加Trizol后運輸。
2.實驗所需要的取材工具以及組織存放器皿等必須經過無菌無酶高溫滅菌處理。
3.取材實驗環境要求無RNA酶污染。
4.如有特別要求，請與服務該區域的*講明