免疫組化非特異性染色及控制方法
一、非特異性染色的原因
1. Ig與Fc受體結合
多見于冰凍切片（特別是淋巴造血組織，淋巴細胞，單核細胞，組織細胞表面多），主要是和二抗反應，因為一抗一般稀釋度均較大，因此Fc受體的干擾基本不存在。由于福爾馬林固定破壞了大部分的Fc受體，所以石蠟切片不多見。
避免方法：
（1）用以二抗相同種族的正常血清封閉切片；
（2）用不含Fc段的抗體，但價格貴。（V區，C1區不含Fc段，用Pepsin消化）
2. 靜電吸附
抗體是一種帶負電荷的球蛋白，容易和帶正電荷的組織相結合，如膠原纖維。
避免方法：
（1）盡量稀釋一抗；
（2）降低抗體的電荷，如用2.5%NaCl，0.05mTBS代替PBS；
（3）用去垢劑如triton-100，Tween-20等處理切片。
3. 二抗與組織中的Ig結合
如羊抗兔的二抗，二抗可以標本中（人）Ig發生交叉反應，科學上越接近的動物，交叉反應越明顯，如人與猴，兔與豚鼠。
避免方法：用與待測組織相同的5%的正常血清稀釋二抗。如人血清。
4. 組織中殘存醛基與Ig的結合
如醛類固定后未能*的沖洗，殘留醛基可以和Ig結合。
避免方法：
（1）*沖洗；
（2）0.02%的新鮮的硼氧化鉀液處理10分鐘后沖洗。
5. 內源性過氧化物酶
紅細胞，粒細胞的含量尤其高，鏡下可以識別，不要將其當成陽性結果。
避免方法：
（1）石蠟切片 0.3%雙氧水-甲醇溶液處理切片；
（2）冰凍切片 3%雙氧水處理切片5分鐘（99:1）因為未經固定包埋，大部分酶未被破壞；
（3）對于骨髓涂片 用非過氧化物酶標記的抗體
6. 內源性*
以 24mg/ml的卵白素封片15分鐘。
