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研域(上海)化學試劑有限公司


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經營模式:生產廠家

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所在地區:上海上海市

聯系人:楊經理 (經理)

技術文章

現貨人組織蛋白酶K(cath-K)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

閱讀:599發布時間:2012-6-20

 人組織蛋白酶K(cath-K)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

研域(上海)化學試劑有限公司國產elisa試劑盒做的確實不錯的,該公司導師一般都認可的,其實和進口的沒什么區別的,而且操作比較簡單.

 

研域(上海)化學試劑有限公司自研究所改制以來在分子生物學試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質體的培養、細胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究。

 

      它是一家技術服務型渠道企業,在行業發展中所承擔的角色是一種溝通產出方和需求方(科研和市場)的媒介,我們致力為行業人才提供了包括科研在內的更多出口,為科研提供了有力的硬件支持,有效地促進科研和市場需求結合,提高了科研成果的轉化效率,使得科研更具活力。目前國家對于生物行業的發展給予了極大的重視,但更多地側重于科研的投入,行業內缺乏*的技術服務體系和渠道支撐... 研域(上海)化學試劑有限公司

 

本試劑盒僅供研究使用。

 人組織蛋白酶K(cath-K)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

檢測范圍:   3pg/ml-150pg/ml

 人組織蛋白酶K(cath-K)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

使用目的:

  本試劑盒用于測定人血清、齦溝液及相關液體樣本中組織蛋白酶K(cath-K)含量。

實驗原理

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人織蛋白酶K(cath-K)水平。用純化的人組織蛋白酶K(cath-K)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組織蛋白酶K(cath-K),再與HRP標記的組織蛋白酶K(cath-K)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組織蛋白酶K(cath-K)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人組織蛋白酶K(cath-K)濃度。 

試劑盒組成 

130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶

2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240pg/ml)0.5ml×1瓶

3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶

4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份

5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張  

6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個

標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

120pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

60pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

30pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

15pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

7.5pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

 

加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

溫育:操作同3。

洗滌:操作同5。

顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作程序總結:

 

 

計算

   以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。 

注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月

OB7771-100gL-Ornithine, monohydrochloride L-*鹽酸鹽[3184-13-2]100g
OLS003056-100mgOvalbumin from Egg White 卵清蛋白[9006-59-1]100mg
OLS003049-1gOvalbumin from Egg White 卵清蛋白[9006-59-1]1g
OLS003048-5gOvalbumin from Egg White 卵清蛋白[9006-59-1]5g
OT1111-100gOvalbumin flake from Egg White 卵清蛋白[9006-59-1]100g
OB0677-25gOxacillin, sodium salt *[1173-88-2]25g
OD0400-250gOxalic acid, dihydrate 草酸二水[6153-56-6]250g
OD0400-1kgOxalic acid, dihydrate 草酸二水[6153-56-6]1kg
OB0678-5gOxaloacetic acid 草酰乙酸[328-42-7]5g
OB0678-25gOxaloacetic acid 草酰乙酸[328-42-7]25g
 


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