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研域(上海)化學試劑有限公司


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聯系人:楊經理 (經理)

技術文章

*人抗*(AT)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

閱讀:390發布時間:2012-6-27

人抗*(AT)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

本試劑盒僅供研究使用。
 

人抗*(AT)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

研域(上海)化學試劑有限公司國產elisa試劑盒做的確實不錯的,該公司導師一般都認可的,其實和進口的沒什么區別的,而且操作比較簡單.

研域(上海)化學試劑有限公司自研究所改制以來在分子生物學試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質體的培養、細胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究。

      它是一家技術服務型渠道企業,在行業發展中所承擔的角色是一種溝通產出方和需求方(科研和市場)的媒介,我們致力為行業人才提供了包括科研在內的更多出口,為科研提供了有力的硬件支持,有效地促進科研和市場需求結合,提高了科研成果的轉化效率,使得科研更具活力。目前國家對于生物行業的發展給予了極大的重視,但更多地側重于科研的投入,行業內缺乏*的技術服務體系和渠道支撐... 研域(上海)化學試劑有限公司

檢測范圍:80 ng/ml -2500 ng/ml

人抗*(AT)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

使用目的:
  本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中抗*(AT)含量。
 

人抗*(AT)酶聯免疫分析ELISA試劑盒

實驗原理
  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人抗*(AT)水平。用純化的人AT抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗*(AT),再與HRP標記的AT抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗*(AT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗*(AT)濃度。
試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(4800ng/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張 
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2400ng/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
1200ng/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
600ng/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
300ng/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
150ng/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
操作程序總結:


計算
   以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
NB6693-50mg 4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide 硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脫氧-b-D-葡萄糖苷 [3459-18-5] 50mg
NB0666-25g 4-(4-Nitrophenylazo)-1-naphthol 鎂試劑 II [5290-62-0] 25g
P6990-25g Patent Blue VF 藍五號鈉鹽 [129-17-9] 25g
PE192-25g Patent Blue VF 藍五號鈉鹽 [129-17-9] 25g
NT2438-10g p-Nitrophenyl-azo-orcinol 鈹試劑Ⅰ [607-96-5] 10g
N2609-25g 4-(p-Nitrophenyl-azo)-resorcinol 鎂試劑 I [74-39-5] 25g
N6688-100mg 4-Nitrophenyl α-L-fuco­pyran­oside, 4-硝基苯-Α-L-吡喃海藻糖苷 [10231-84-2] 100mg
N6672-100mg p-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside 對硝基苯基-beta-D-吡喃葡萄糖苷 [2492-87-7] 100mg
N6694-500mg 4-Nitrophenyl β-D-glucuronide 4-硝基苯基-beta-D-葡萄糖醛酸苷 [10344-94-2] 500mg
N6690-100mg α-p-Nitrophenylglycerol 1-(4-硝基苯基)甘油 [2207-68-3] 100mg
N14K66-25g 4-Nitrophenylhydrazine 4-硝基苯肼 [100-16-3] 25g
NB6689-10mg 2-Nitrophenyl-β-D-xylopyranoside 2-硝基苯基-beta-D-木糖苷 [10238-27-4] 10mg
N5054-100g 5-Nitrosalicylic acid 5-硝基水楊酸 [96-97-9] 100g
N6691-25mg N-Nitroso-N-methylurea N-亞硝基-N-甲基脲 [684-93-5] 25mg
NB0667-25g 1-Nitroso-2-naphthol α-亞硝基-β-萘酚 [131-91-9] 25g
 


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