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48T人內皮抑素ELISA檢測試劑盒的試驗步驟

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研域上海化學試劑有限公司專業(yè)供應各種屬ELISA試劑盒,金標試劑盒,細胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。

人內皮抑素ELISA檢測試劑盒

試驗原理:
    ES試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知ES濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將ES和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中ES的濃度呈比例關系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人內皮抑素ELISA檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

人內皮抑素ELISA檢測試劑盒

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

人內皮抑素ELISA檢測試劑盒

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的ES標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的ES含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-240pg/ml
4、敏感度: 0.1 pg/mlRabbit anti-Guinea IgG/Gold 金標記兔抗豚鼠IgG (10nm/15nm) 0.5ml
Rabbit anti-Guinea IgG/Gold 金標記兔抗豚鼠IgG (10nm/15nm) 1ml
Rabbit anti-Guinea IgM/Gold 金標記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm) 2ml
IGSF8/CD316(Immunoglobulin superfamily member 8) 免疫球蛋超家族成員8抗體 0.2ml
IKB beta (Inhibitor of KB β ) KB抑制蛋白β抗體 0.2ml
IKB α (Inhibitor of KBα) KB抑制蛋白α抗體 0.1ml
IKB α (Inhibitor of KBα) KB抑制蛋白α抗體 0.2ml
p-IKB alpha(phospho S32 + S36)(NF kappa B inhibitor alpha) 磷酸化KB抑制蛋白α抗體 0.2ml
IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 0.2ml
IL-9(Interleukin-9) 白介素9抗體 0.2ml
Rabbit anti-mouse IgG/Gold  金標記兔抗小鼠IgG(10nm/15nm) 0.5ml
Rabbit anti-mouse IgG/Gold  金標記兔抗小鼠IgG(10nm/15nm) 1ml

若需要了解試劑盒的詳細信息,詳情:楊       


 


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