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免疫組化染色操作步驟-上海信帆生物

2016-6-29  閱讀(1511)

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免疫組化染色

S—P免疫組化染色試劑盒采用生物素標記的第二抗體與鏈霉菌抗生物素蛋白連接的過氧化物酶及底物色素混合液來測定細胞和組織中的抗原。
S—P免疫組化染色步驟:
1) 石蠟切片脫蠟和水化后,用PBS(pH7.4)沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。
2) 根據(jù)每一種抗體的要求,對組織抗原進行相應的修復。
3) 每張切片加1滴或50ul過氧化酶阻斷溶液(試劑A),以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性,室溫下孵育10分鐘。
4) PBS沖洗3×3’。
5) 甩去PBS液,每張切片加1滴或50ul的非免疫性動物血清(試劑B),室溫下孵育10分鐘。
6) 甩去血清,每張切片加1滴或50ul的*抗體(用戶自選),室溫下孵育60分鐘或4℃過夜,建議參閱每種抗體的說明書。
7) PBS沖洗3×5’。
8) 甩去PBS液,每張切片加1滴或50ul生物素標記的第二抗體(試劑C),室溫下孵育10分鐘。
9) PBS沖洗3×3’。
10)甩去PBS液,每張切片加1滴或50ul鏈霉菌抗生物素-過氧化物酶溶液(試劑D),室溫下孵育10分鐘。
11)PBS沖洗3×3’。
12)甩去PBS液,每張切片加2滴或100ul新鮮配制的DAB或AEC溶液,顯微鏡下觀察3—10分鐘,陽性顯色為棕色或紅色。
13)自來水沖洗,蘇木素復染,0.1%HCL分化,0.1%氨水或PBS沖洗返藍。
14)如果用DAB顯色,則切片經(jīng)過梯度酒精脫水干燥,(二甲苯透明),中性樹膠封固;如果用AEC顯色,則切片不能經(jīng)酒精脫水,而直接用水性封片劑封片。

上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。
標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進口放免試劑盒,國產(chǎn)放免試劑盒,進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務:放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。

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