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信帆生物為大家分享：炎癥因子ELISA試劑盒實驗中，細胞樣本勻漿的方式和方法。此方法同樣適用于生化指標的檢測。
勻漿的方式：手工勻漿，超聲破碎,裂解液裂解,反復(fù)凍融。
① 手工勻漿：在細胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根據(jù)所測指標的不同而有所改變，一般加入0.5ml，細胞密度不小于一百萬個/ml），混勻，將細胞懸浮于PBS中，用移液器將細胞懸浮液移至玻璃勻漿管中（2ml玻璃勻漿管），將玻璃勻漿管置于冰水混合物中，手動勻漿3分鐘，然后取破碎好的細胞懸浮液進行測定。
② 超聲破碎:
在細胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根據(jù)所測指標的不同而有所改變，一般加入0.5ml，細胞密度不小于一百萬個/ml），混勻，將細胞懸浮于PBS中，在冰水浴條件下進行如下操作:
a、用超聲粉碎機進行粉碎，可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎，也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀，用400安培，5秒/次，間隙10秒反復(fù)3～5次。
b、用超聲細胞破碎儀，300W功率，每次超聲3～5秒，間隔30秒，重復(fù)4～5次。
③ 裂解液裂解
常用裂解液有SDS、NP-40、TritonX-100,這三種去垢劑的作用是不同的，或者說作用力量強弱不同。
1、SDS屬于離子型去垢劑，zui厲害，基本可以把細胞*破掉，DNA會釋放出來，裂解液變得很粘稠。
2、NP-40是很溫和的去垢劑，1%濃度的基本可以破壞掉胞膜，而對核膜破壞的作用弱，結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
3、TritonX-100的能力介于NP40和SDS之間，偏向于NP40，也是常用的細胞裂解液成分之一，在保護蛋白活性方面有一定作用（SDS基本會使蛋白變性失活）。
去垢劑屬性只是一方面，buffer、配比、濃度、提取方法和材料處理也都是關(guān)鍵因素
由于很多裂解液都是蛋白變性劑,對酶活力的測定有一定的影響,一般不推薦用裂解液進行裂解。
④ 反復(fù)凍融:
在細胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根據(jù)所測指標的不同而有所改變，一般加入0.5ml，細胞密度不小于一百萬個/ml），混勻，將細胞懸浮于PBS中，放低溫冰箱中結(jié)冰，溶解，再結(jié)冰，再溶解，反復(fù)3次左右）。
由于反復(fù)凍融對酶活力影響較大,一般不推薦使用
上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,人血清,動物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。
標準品對照品：進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
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放免試劑盒：進口放免試劑盒，國產(chǎn)放免試劑盒，進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務(wù)：放免代測，WB實驗，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細胞染色代測，生化實驗代測等。
