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    1、加水于滅菌器內到規定的水平面。
    2、需滅菌的物品（分裝在試管、三角燒瓶中的固、液體培養基），棉塞、硅膠泡沫塞等用防潮紙包好（防止鍋內水汽把棉塞淋濕），放入滅菌鍋內的套筒中。擺放要疏松，不可太擠，否則阻礙蒸汽流通，影響滅菌效果。
    3、將滅菌鍋蓋的排氣管插人套筒側壁的凹槽內，關閉滅菌鍋蓋旋緊螺栓，切勿漏氣。
    4、打開放氣閥，加熱，熱蒸汽上升，以排除鍋內冷空氣，排氣約5~ l0min，關閉放氣閥。
    5、關閉放氣閥后，整個滅菌鍋成為密閉狀態，而蒸汽又不斷增多，這時壓力和溫度都上升，直至壓力表指針達到所需壓力時，開始計時，通過調節熱源，維持此壓力到所需時間。
    6、滅菌完畢，待壓力自然降至0時，打開放氣閥，注意不能打開過早，否則突然降壓致使培養基沖騰，使棉塞、硅膠泡沫塞沾污，甚至沖出容器以外。
    7、打開滅菌鍋蓋，取出已滅菌的器皿及培養基。
8、滅菌鍋用完后，將鍋內剩余的水倒掉，以免日久腐蝕。