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6月新關注:來看上海恒遠分享培養基細胞計數的步驟
閱讀:1331 發布時間:2014-6-4提 供 商 | 上海恒遠生物科技有限公司 | 資料大小 | 58.6KB |
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1、取50μl培養基細胞懸浮液與50μl trypan blue等體積混合均勻于1.5ml小離心管中。
2、取少許混合液(約15μl)自血球計數盤chamber上方凹槽加入,蓋上蓋玻片,于100倍倒立顯微鏡下觀察,活細胞不染色,死細胞則為藍色(或紅色-Erythrosin bluish)。
3、計數四個大方格之細胞總數,再除4,乘以稀釋倍數(至少乘以2,因與trypanblue等體積混合),zui后乘以104,即為每ml中培養基細胞懸浮液之細胞數。若細胞位于線上,只計上線與右線之細胞(或計下線與左線之細胞)。
上海恒遠生物提醒注意:
4大格細胞總數×稀釋倍數×104/4=細胞數/ml;每一大格的體積=0.1cm×0.1cm×0.01cm=10-4ml
計數板計數時,zui適濃度為5~10×105細胞/ml,此范圍外計數誤差偏大。高濃度培養基細胞懸液,可取出部分作稀釋或連續稀釋后計數。