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    ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體和檢測抗體在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
    標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節，將凍干的細胞因子復溶。
    一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。為了優化靈敏度，建議放置一個晚上孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
1. 仔細閱讀說明書；
2. 確定試劑盒在有效期內；
3. 按說明書確定所有試劑齊全（數量、體積）；
4. 標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份；
5. 注意低溫保存；
6. 準備好所有實驗額外所需物品；
7. 根據檢測標本數量確定所需試劑的量；
8. 按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。
    在一般的概念里，ELISA技術的可操作性強，不需復雜設備，甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結果，便可完成該技術的操作。隨著人們對質量控制意識的加強，盡可能做到zui低限度的減少系統誤差，以及減少勞動強度等觀念的不斷改進，解決ELISA技術中加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的系統誤差問題及率運作問題導致了自動化概念的形成。ELISA技術的加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的科學地、有機地、系統地結合，盡可能地減少各環節的人為因素的影響，便成為自動化ELISA技術的理論基礎。