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分子生物學概念:
*溶液 ,100mg/mL1mL圖片分子生物學是從分子水平上研究生命現(xiàn)象的學科,通過研究生物大分子(核酸、蛋白質(zhì))的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面,來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì),如遺傳信息的傳遞,基因的結(jié)構(gòu)、復制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達調(diào)控和表達產(chǎn)物的生理功能,以及細胞信號的轉(zhuǎn)導等。
自20世紀50年代以來,分子生物學是生物學的前沿與生長點,其主要研究領(lǐng)域包括蛋白質(zhì)體系、蛋白質(zhì)-核酸體系,其中心是分子遺傳學;以及蛋白質(zhì)-脂質(zhì)體系,即生物膜。
生物大分子,特別是蛋白質(zhì)和核酸結(jié)構(gòu)功能的研究,是分子生物學的基礎(chǔ)。現(xiàn)代化學和物理學理論、技術(shù)和方法的應用推動了生物大分子結(jié)構(gòu)功能的研究|
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分子生物學與生物化學和生物物理學關(guān)系十分密切,它們之間的主要區(qū)別在于:*,生物化學和生物物理學是用化學的和物理學的方法研究在分子水平,細胞水平,整體水平乃至群體水平等不同層次上的生物學問題。而分子生物學則著重在分子(包括多分子體系)水平上研究生命活動的普遍規(guī)律;第二,在分子水平上,分子生物學著重研究的是大分子,主要是蛋白質(zhì),核酸,脂質(zhì)體系以及部分多糖及其復合體系。而一些小分子物質(zhì)在生物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化則屬生物化學的范圍;第三,分子生物學研究的主要目的是在分子水平上闡明整個生物界所共同具有的基本特征,即生命現(xiàn)象的本質(zhì);而研究某一特定生物體或某一種生物體內(nèi)的某一特定器官的物理、化學現(xiàn)象或變化,則屬于生物物理學或生物化學的范疇。
*溶液 ,100mg/mL1mL圖片實驗要點
1.CTAB 溶液在低于15℃時會析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。
2.在適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可減輕這兩種現(xiàn)象,同時可加入適量的(*—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密,使水相和有機相分層較好。 細菌的培養(yǎng)和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時至對數(shù)生長后期。小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
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