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閱讀:274發(fā)布時(shí)間:2014-9-23
魚褪黑激素(melatonin)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中魚褪黑激素(melatonin)水平。用純化的魚褪黑
激素(melatonin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加褪黑激素
(melatonin),再與 HRP 標(biāo)記的褪黑激素(melatonin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體
復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸
的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的褪黑激素(melatonin)呈正相關(guān)。用酶
標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚褪黑激素(melatonin)
濃度。
:021 60340850 021 60340830 021 60340820
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魚褪黑激素(melatonin)Elisa試劑盒計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實(shí)際濃度。
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