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博研科研試劑網
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閱讀:82發布時間:2013-10-31
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人toll樣受體2(TLR2)Elisa試劑盒操作步驟
1.
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
60ng/mL
5 號標準品
150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
30ng/mL
4 號標準品
150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
15ng/mL
3 號標準品
150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
7.5ng/mL
2 號標準品
150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
3.75ng/mL
1 號標準品
150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2.
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.
溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.
配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5 次,拍干。
6.
加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.
溫育:操作同 3。
8.
洗滌:操作同 5。
9.
顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
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人toll樣受體2(TLR2)Elisa試劑盒標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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