人結(jié)核菌素（PPD）Elisa試劑盒操作步驟
1.
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
40ng/L
5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20ng/L
4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ng/L
3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5ng/L
2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5ng/L
1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，
然后再加待測(cè)樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.
溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.
配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6.
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.
溫育：操作同 3。
8.
洗滌：操作同 5。
9.
顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人結(jié)核菌素（PPD）Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人結(jié)核菌素（PPD）水平。用純化的人結(jié)核菌素
（PPD）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入結(jié)核菌素（PPD），
再與 HRP 標(biāo)記的結(jié)核菌素（PPD）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗
滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終
的黃色。顏色的深淺和樣品中的結(jié)核菌素（PPD）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)
定吸光度（OD 值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人結(jié)核菌素（PPD）濃度
人結(jié)核菌素（PPD）Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
大鼠17-酮類固醇(17-KS)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠5核苷酸酶(5-NT)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠L苯*解氨酶(PAL)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠FMS樣*激酶3(Flt3)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠FMS樣*激酶3配體(Flt3L)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠β細(xì)胞素(BTC)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠*(cAMP)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠孕激素/孕酮(PROG)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠雌激素(E)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠游離β絨毛膜*(f-βCG)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠醛固酮(ALD)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠*(NA)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
大鼠前列腺素F(PGF)試劑盒說(shuō)明書，96T/48T代測(cè)
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