細胞培養操作規程;
一.人腹膜毛細血管內皮細胞提取物說明書培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
以下是人腹膜毛細血管內皮細胞提取物說明書的訂購信息;?
人腹膜毛細血管內皮細胞提取物說明書 【Human Peritoneal : Normal Peritoneal Capillary Endothelial Cell Derivatives】
人腹膜毛細血管內皮細胞提取物是從人腹膜毛細血管內皮細胞提取的,人腹膜毛細血管內皮細胞從正常人腹膜組織制備。正常人腹膜組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司科技提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞培養的優點
1人腹膜毛細血管內皮細胞提取物說明書.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
注意事項;
1. 人腹膜毛細血管內皮細胞提取物說明書一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
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水稻水培養液250g用于水稻的水培養液
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地衣芽孢桿菌 產抗生素 支/瓶
HE瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離培養
DTM培養基 250g 用于食品中真菌的培養
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BAIRD-PARKER 貝爾德-帕克瓊脂/葡萄狀球菌選擇培養基 incubation media BAIRD-PARKER 貝爾德-帕克瓊脂/葡萄狀球菌選擇培養基
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亞碲酸血瓊脂基礎PotassiumTelluriteBloodAgarBase用于白喉桿菌的分離培養
雙歧桿菌瓊脂培養基 250g 用于雙歧桿菌的分離培養
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IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 AAV-293( 胚腎細胞)TE-10(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人臍血間質干細胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells
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HOS細胞,人骨肉瘤細胞 皺褶青霉 人胚肺細胞系;KuMA
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人腹膜毛細血管內皮細胞提取物說明書大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106
EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細胞裂解液 (陽性對照)
腹膜毛細血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HCT-116細胞,低分化結腸腺癌細胞 人子宮內膜腺癌細胞,HEC-1-A細胞 人肺成纖維細胞cDNAHPF cDNA
長尾綠猴腎細胞;4647
HAPLN1 Others Human 人 HAPLN1 人細胞裂解液 (陽性對照)