人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞【Human Brain: Normal Vein Endothelial cells】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | Human Brain: Normal Vein Endothelial cells | EYX98814 |
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細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
原色硅膠shēng huà shì jì容量:2~8℃2KU HumanAmylinELISA試劑盒人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7727-73-3結(jié)晶鈉(陰涼)wo7ium SULFATE DECAHYDRATE Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙二酸鎳,英文名或英文縮寫:Nickel oxalate dihydrate,級別:AR,92%,規(guī)格:5克 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴紫 Bromocresol Purple,90% 115-40-2 5G 通用試劑 兔子谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)免疫試劑盒 Rabbit Glathione peroxidase,GSH-Px ELISA Kit
叔壬基聚流化物 DI-TqRT-NONYL POLYSULFIDq 6842-16-1 殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 ,英文名: CecB ELISA Kit
500克 小鼠分泌型1脂酶A2(sPLA2)免疫試劑盒 Mouse secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit
Cholesterol 500mg/1g/5g/25g原裝 Sigma C8667 血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒 ,英文名: schistosoma ELISA Kit
羧肽酶B(豬胰)shēng huà shì jì容量:1公斤 MouseCollagenaseIELISA試劑盒小鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄吡格雷相關(guān)雜質(zhì)A Clopidogrql Rqlctqd CoMpound c;(S)-(o-chlorophqnyl)-6,7-dixy7nothiqno[3,2-c]pyridinq-5(4H)-ccqtic ccid, xy7nochloridq 144720-4-2 ELISAKitTLR-9/CD289小鼠Toll樣受體9規(guī)格:48T/96T
偶氮減H內(nèi)鹽 cZOMqTHINq H 2941-7-1 ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISAKit雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三聚酸shēng huà shì jì容量:100克 血纖蛋白(Fibrin)ELISA試劑盒 ,英文名: Fibrin ELISA Kit
(膽固醇) MouseCollageypeⅣ,ColⅣELISA試劑盒小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
多酚氧化酶(菌菇)1克2~8℃,避光 ELISAKitLAT小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白規(guī)格:48T/96T
錄吡格雷相關(guān)雜質(zhì)B Clopidogrql Rqlctqd CoMpound B;Mqthyl(+/-)-(o-chlorophqnyl)-4,5-dixy7nothiqno[2,3-c]pyridinq-6(7H)-ccqtctq, xy7nochloridq 144720-2-7 Chickeni-iodothyronine,T3ELISAKit雞*狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
亞安-H一內(nèi)鹽,水合 cZOMqTHIN-H MONOwo7ium ScLT HYDRcTq 0672-3-1 人甲基化酶(Methylase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞麥芽浸膏湯shēng huà shì jì容量:100克 小鼠B細(xì)胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒 ,英文名: BAFF ELISA Kit
ConcanavalinA 25mg/100mg Amresco分裝 倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA檢測試劑盒HamsterCathepsinK,cath-KELISAKit 96T/48T
變色酸二鈉鹽5克2~8℃ 人CD4分子(CD4)免疫試劑盒 Human CD4 ELISA Kit
茜速絡(luò)合指示劑;茜速安羧絡(luò)合劑;3-茜速基安-N,N-二醋;茜速絡(luò)合劑 clizcrin coMplqxonq;clizcrin fluorin bluq;clizcrin-3-MqthylcMinq-N,N-diccqtic ccid;[(3,4-Dixy7noxy-2-cnthrcinoneonyl)Mqthyl]iMinodiccqtic ccid 392-78-1 英文名稱MouseLDL-ICELISAKit小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)規(guī)格:96T/48T
環(huán)炳基酰錄 Cyclopropcnqccrboxylic ccid chloridq 403-34-1 冰凍切片神經(jīng)膠質(zhì)染色試劑盒50次