小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒多少錢Mouse TNFα ELISA Kit

小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒多少錢Mouse TNFα ELISA Kit【實(shí)驗(yàn)用途】TNFα，腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞外被剪切成17KDa的成熟形態(tài)（157個(gè)氨基酸）?；钚缘腡NFα以非共價(jià)鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在，但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細(xì)胞都能合成TNFα，包括各種免疫細(xì)胞（單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、NK細(xì)胞）和非免疫細(xì)胞（上皮細(xì)胞、纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞、Kuppfer細(xì)胞等）。TNFα的合成受到很多因素的影響。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。。
試劑配制:
1、小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒多少錢酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1.小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒多少錢血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。
仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1  PAI-1 規(guī)格：48T/96T

大鼠纖溶酶原激活物抑制因子  PAI 規(guī)格：48T/96T

大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物  PAP 規(guī)格：48T/96T

大鼠纖連蛋白  FN 規(guī)格：48T/96T

大鼠細(xì)胞周期素D3  Cyclin-D3 規(guī)格：48T/96T

大鼠細(xì)胞周期素D2  Cyclin-D2 規(guī)格：48T/96T

大鼠細(xì)胞周期素D1  Cyclin-D1 規(guī)格：48T/96T
小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒多少錢小鼠水通道蛋白3  AQP-3 規(guī)格：48T/96T

小鼠水通道蛋白2  AQP-2 規(guī)格：48T/96T

小鼠水通道蛋白1  AQP-1 規(guī)格：48T/96T

小鼠水通道蛋白0  AQP-0 規(guī)格：48T/96T

小鼠雙氫睪酮  DHT 規(guī)格：48T/96T

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子  ECF 規(guī)格：48T/96T

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2  CCL24 規(guī)格：48T/96T
注意事項(xiàng)：
1．小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒多少錢試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
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7． 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
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9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。