鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)
描述:
量子點(diǎn)標(biāo)記的鏈霉親和素(QS系列產(chǎn)品)由鏈霉親和素與帶官能團(tuán)的活性量子點(diǎn)共價(jià)偶聯(lián)得到。鏈霉親和素與有高度的親和力與性,利用-親和素系統(tǒng),將量子點(diǎn)標(biāo)記的鏈霉親和素與化的抗體、核酸、受體結(jié)合,可把量子點(diǎn)標(biāo)記到細(xì)胞、核酸、上進(jìn)行示蹤檢測(cè)及功能研究,為量子點(diǎn)的應(yīng)用提供一種通用的標(biāo)記物。其應(yīng)用范圍包括:顯微成像、蛋白印跡、流式細(xì)胞及動(dòng)態(tài)示蹤。
摘要:
目的:探討鏈霉親和素修飾的CdSe–ZnS量子點(diǎn)對(duì)聚合酶鏈反應(yīng)的影響。
方法:將鏈酶親和素修飾的量子點(diǎn)濃度進(jìn)行稀釋觀察其對(duì)于聚合酶鏈反應(yīng)體系的濃度效應(yīng);反應(yīng)體系中含有濃度的鏈酶親和素修飾的量子點(diǎn),在不同的退火溫度下進(jìn)行擴(kuò)增,觀察鏈酶親和素修飾的量子點(diǎn)對(duì)退火溫度的影響;將不同濃度的BSA加入到含有濃度的鏈酶親和素修飾的量子點(diǎn)的反應(yīng)體系中,觀察BSA的影響作用;將不同的Taq酶與不同濃度鏈酶親和素修飾的量子點(diǎn)組合,觀察對(duì)擴(kuò)增體系的影響。
結(jié)果:濃度鏈霉親和素修飾的量子點(diǎn)可以聚合酶鏈反應(yīng)的擴(kuò)增效率,拓寬PCR的退火溫度范圍;BSA可以逆轉(zhuǎn)鏈霉親和素修飾的量子點(diǎn)對(duì)于PCR的優(yōu)化作用;量子點(diǎn)可能是與Taq酶相互作用,來(lái)影響PCR的擴(kuò)增效能。結(jié)論:濃度的鏈霉親和素修飾的量子點(diǎn)可以優(yōu)化PCR的反應(yīng)體系。
1.1株金色葡球閑9
1.2主要試劑量子點(diǎn)SA- Cdse/ns525。PCR反應(yīng)試劑。
1.2方法
1.2.1PCR擴(kuò)增在高壓火菌的 Eppendoff管中,50l的反應(yīng)體系,其中含有50mmol/LKC,10mmol/LTisC,1.5mmol/.Mg(2和0.4mmol/I.的dNTP混合物,上游和下游引物均為0.2ml/L,DNA聚合酶0.02U/ul,鏈親和素修飾的量子點(diǎn)的用量依據(jù)實(shí)驗(yàn)需要確定。在PF2400PCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行循環(huán)擴(kuò)增。量子點(diǎn)的濃度進(jìn)行系列優(yōu)化,觀察其對(duì)PCR擴(kuò)增的影響,對(duì)退火溫度進(jìn)行系列調(diào)整觀察其対PCR擴(kuò)增的影響。
1.2.2擴(kuò)増產(chǎn)物檢測(cè)將擴(kuò)增后的 Eppendol管離心后,取5u上清液在1.5%的瓊脂糖凝膠含0.5g/ml.B)中,于1xTBE緩沖液中電泳.在生物電泳圖像分析系統(tǒng)觀察結(jié)果并照相。
2結(jié)果
2.1不同濃度的SA-CdSeZ.nS525量子點(diǎn)對(duì)PCR擴(kuò)增結(jié)果的影響
我們將SA- Cdse/ns525量子點(diǎn)的濃度進(jìn)行系列稀釋,使其在50PCR反應(yīng)體系中的終濃度分別為0. 2 nmol/L: 0.4 nmol/L: 0.6 nmol/: 0. 7nmol/0.8mmol/,分別加入到PCR反應(yīng)體系中,DNA聚合酶0.02U/l,觀察其對(duì)擴(kuò)增體系的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增體系中含有量的鏈親和素修飾的量子點(diǎn)可以擴(kuò)增效能
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西安齊岳生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)的納米靶向試劑及材料供應(yīng)商,我公司實(shí)驗(yàn)室研究上市熒光量子點(diǎn)系列產(chǎn)品(Fluorescent Quantum Dot)我們可以提供量子點(diǎn)表面修飾科研小分子/量子點(diǎn)表面修飾糖類小分子/量子點(diǎn)表面修飾功能性小分子/PEG化的科研-量子點(diǎn)/咪唑修飾的石墨烯量子點(diǎn)/氨基-甲?;溥蛐揎椷€原石墨烯等定制量子點(diǎn)產(chǎn)品。提供不同表面配體的核殼型熒光量子點(diǎn)產(chǎn)品包括有:十八胺、alkyl、油酸、氨基和羧基。我們的Fluorescent nanocrystals產(chǎn)品還包括脂溶性的和水溶性的,水溶性的是通過(guò)包裹一層聚乙二醇PEG而實(shí)現(xiàn)水溶性的,表面可以修飾氨基和羧基。
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