土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。
土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法測定原理:
漆酶分解底物ABTS 產生ABTS 自由基,在420nm 處的吸光系數遠大于底物ABTS,測定ABTS 自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀,甲苯。
試劑組成和配制:
試劑一:液體100mL×1 瓶,4℃保存。
工作液:粉劑×2 瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加25mL試劑一溶解。
土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法測定操作:
分光光度計預熱30min,調節波長到420nm,蒸餾水調零
對照管 | 測定管 | |
樣本(g) | 0.1 | 0.1 |
試劑一(uL) | 1000 | |
工作液(uL) | 1000 | |
30℃震蕩反映10min,冰浴5min,10000g,4℃離心10min,取出800ul反應液立即于420nm處測定吸光值,分別記為A1,A2。△ A=A2-A1 |
土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法注意事項:
1.工作液需臨用前配制,并且盡快使用,4℃保存一周,若變色則不能使用。
2.測定之前進行預實驗,若吸光值較高,請將樣品用提取液進行適當的稀釋再測定,并在計算公式中乘以稀釋倍數。
3.反應完立即記錄數據,以免造成逆向反應影響實驗結果。