細(xì)胞簡介：
大鼠肺大動脈內(nèi)皮分離自肺大動脈組織；肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈，經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
方法簡介：
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 肺動脈組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7052 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺大動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺大動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit
Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)試劑盒
粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M
體液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitAE禽腦脊髓
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒 48T
豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
8號染色體開放閱讀框72抗體
豬血栓素A2(TXA2)試劑盒
Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒
Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形體IgM抗體
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量試劑盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒
豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白抗體
TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原
ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原
BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
