細胞簡介:
大鼠呼吸道上皮分離自呼吸道;呼吸道是肺呼吸時氣流所經過的通道,有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部:鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道,合稱為下呼吸道,或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),它能溫暖(或冷卻)、濕潤和凈化吸入的空氣,對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,其內表面覆蓋著黏膜,黏膜內分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮,分布于呼吸道的內表面,主要由柱狀,杯形,梭形和錐形等不同形狀細胞組成。看上去像復層上皮,但實際上所有細胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,故稱假復層柱狀上皮,上皮表面有纖毛,杯狀細胞可分泌粘液,包裹著大量細菌,借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠呼吸道上皮經pan-cytokeratin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 呼吸道 | 產品貨號 | YS-01X7502 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠固醇調節元件結合蛋白1A(SREBP-1A)試劑盒 ,英文名: SREBP-1A ELISA Kit
Rabbit type III procollagen (P III NP) ELISA Kit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒
破傷風芽孢梭菌(CT)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-13(HumanMaixmetalloproteinase13)ELISAkit人基質金屬蛋白酶13
體液基質金屬蛋白酶(MMP-3)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitET-1犬內皮素1
豬雌激素(E)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬雌二醇受體(ER)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬雌二醇(E2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
γ谷氨酰轉肽酶2輕鏈抗體
豬紅細胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒
One pit protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)試劑盒
Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha-GST(HumanAlpha-glathioneS-ansferases)ELISAKit人αS轉移酶
血液結構型神經元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次
Plagrowthhormone,GHELISAKit植物生長激素(GH)試劑盒
乙型肝炎病毒X蛋白反轉錄蛋白4抗體
PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 (His 標簽) Protein
低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)
ATP5D重組人 ATP5D 蛋白 (His 標簽) Protein
ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標簽)
TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白
大鼠呼吸道上皮細胞5-LOX (5-lipoxygenase 0.5mg5-LOX (5-lipoxygenase) 5-脂氧合酶抗原
ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標簽)
PGLYRP1重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標簽) Protein
IL1R2 Protein Rat 重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標簽)
BLOC1S2重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標簽) Protein