細胞簡介:
大鼠角膜內皮分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發揮生理功能的必要條件之一,而角膜內皮細胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內皮細胞是角膜內層的單層細胞,構成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過離子“泵”功能調節角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態,保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內皮細胞功能出現紊亂,常導致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內皮細胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內皮細胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性,維持角膜和房水內Na+梯度,防止水分滲入角膜內,維持角膜實質層相對脫水狀態,維持透明性。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠角膜內皮采用混合膠原酶消化結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠角膜內皮經NSE(神經元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 眼角膜組織 | 產品貨號 | YS-01X7517 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒
Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)試劑盒
Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉錄復合體(GTC)試劑盒 進口分裝
Deererythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒
載玻片細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內皮型合成酶(eNOS)試劑盒
豬α干擾素試劑盒 豬α干擾素試劑盒 規格型號:96T/48T 豬α干擾素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬α干擾素試劑盒、豬α干擾素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬白介素10試劑盒 豬白介素10試劑盒 規格型號:96T/48T 豬白介素10試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬白介素10試劑盒、豬白介素10eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒 豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒 規格型號:96T/48T 豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬B細胞淋巴瘤因子2試劑盒、豬B細胞淋巴瘤因子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豬Bcl-2相關X蛋白試劑盒 豬Bcl-2相關X蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 豬Bcl-2相關X蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:豬Bcl-2相關X蛋白試劑盒、豬Bcl-2相關X蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
整合素α3重鏈抗體
豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒
Human macrophage colony stimulating factor receptor (M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)試劑盒
PorcinevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha1-AT(HumanAlpha1-Aiypsin)ELISAKit人α1抗
血液0酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量試劑盒10次
Mouseβ-Defensins,β-DFELISAKit小鼠β-防御素(β-DF)試劑盒
TRIM16L蛋白抗體
RSV-F重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 蛋白 (His 標簽) Protein
Tn-C(Tenascin-C 0.5mgTn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原
RAC1重組人 RAC1 / MIG5 蛋白 (GST 標簽) Protein
AMBP Protein Human 重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白
VEGFC Protein Human 重組人 VEGF-C 蛋白 (His 標簽)
大鼠角膜內皮細胞Tn-C(Tenascin-C 0.5mgTn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原
AMBP Protein Human 重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白
RSV-F重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 蛋白 (His 標簽) Protein
VEGFC Protein Human 重組人 VEGF-C 蛋白 (His 標簽)
RAC1重組人 RAC1 / MIG5 蛋白 (GST 標簽) Protein