細(xì)胞簡介:
大鼠毛囊干分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊干細(xì)胞是在毛囊外根鞘隆突部中的一種細(xì)胞。毛囊干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,在體內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài),在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力。研究發(fā)現(xiàn),毛囊干細(xì)胞具有多向分化潛能,它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺,參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過程。毛囊干細(xì)胞和其它成體干細(xì)胞一樣,具有慢周期性、未分化性、自我更新和體外增殖能力強(qiáng)等特點。毛囊干細(xì)胞分化經(jīng)毛囊干細(xì)胞(hair follicle stem cells,FSC)、短暫增殖細(xì)胞(transit amplifying cells,TAC)有絲分裂后分化細(xì)胞(postmitotic differentiating cells,PDC)三個階段。毛囊干細(xì)胞在光鏡下呈立方形,細(xì)胞體積小,核漿比率大,表面光滑,皺褶少,又被稱為非鋸齒形細(xì)胞,細(xì)胞體積的增大與增殖能力呈負(fù)相關(guān)。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有少許微絨毛,細(xì)胞核存在許多卷曲,染色質(zhì)彌散分布,這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細(xì)胞的特性。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠毛囊干采用膠原酶 - 聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠毛囊干經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 毛囊 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7857 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠毛囊體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代步驟:
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA 試劑盒
Rat amylin (Amylin) ELISA Kit 大鼠胰淀素(Amylin)試劑盒
HumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanGlathioneperoxidase,GSH-Px試劑盒人過氧化酶(GSH-Px)試劑盒
組織單胺氧化酶A型(MAO-A)活性熒光定量試劑盒20次
HumanMotilin,MTLELISAKit人血管活性腸肽(VIP)試劑盒
中文名稱 方法 規(guī)格
兔子端粒酶(TE)ELISAKit ELISA.
兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISAKit ELISA.
兔子促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISAKit ELISA.
WDR68蛋白抗體
豬表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒
Human ai BB aibody (BB-Ab) ELISA Kit 人抗BB抗體(BB-Ab)試劑盒
Porcinelowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit 豬低分子肝素(LMWH)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALDHELISAKit大鼠乙脫氫酶
血液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒50次
MouseVitaminB6,VB6ELISAKit小鼠B6(VB6)試劑盒
磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體
CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)
CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠毛囊干細(xì)胞內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Intelectin 1 (ITLN1)
ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein