細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠腦動脈血管內皮分離自腦動脈組織;腦動脈有成對的頸內動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環;靜脈系多不與同名動脈拌行,所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內靜脈;各級靜脈都沒有瓣膜,它包括腦的動脈系統和腦的靜脈系統。腦動脈血管內皮細胞主要功能:①維持血管內外的動態平衡;②合成和分泌細胞因子和介質;③維持凝血和纖溶的動態平衡。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腦動脈血管內皮采用膠原酶-混合消化法并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腦動脈血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腦動脈組織 | 產品貨號 | YS-01X7335 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA 試劑盒
Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)試劑盒
Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)試劑盒 進口分裝
HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1試劑盒人CXC趨化因子受體1(CXCR1)試劑盒
組織ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
中文名稱 方法 規格
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit ELISA.
人胰島素原(PI)ELISAKit ELISA.
人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA.
HRAS1抗體
豬白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒
Human ai EB virus aibody (EBV) ELISA Kit 人抗EB病毒抗體(EBV)試劑盒
Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALDELISAKit大鼠固同
血液逆轉錄酶(REVERSEANSCREPTASE)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit小鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒
激活素受體相互作用蛋白1抗體
DPP7重組人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標簽) Protein
趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)
MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein
AKT1 Protein Human 重組人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
大鼠腦動脈血管內皮細胞趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)
AKT1 Protein Human 重組人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 標簽)
DPP7重組人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。