| 商品屬性:
組織來源 | 腦組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | YS-01X7363 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
| 細(xì)胞介紹:
大鼠小腦顆粒分離自小腦皮層組織;神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,直徑約10μm,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,而且數(shù)量多、便于取材,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元,在哺乳動物的小腦內(nèi)數(shù)量為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系,形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路,在小腦的神經(jīng)活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元,導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損,從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào)。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng)、病理發(fā)生的機理特別是分子機理,有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo),這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè),小腦顆粒細(xì)胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細(xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。
| 方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒經(jīng)NSE免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項:
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常, 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒 ,英文名: M2-PK ELISA Kit
Mouse alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒
ELISA 小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78) 分裝
CLIAKitforKLK11(HumanKallikrein11)ELISAKit人11
通用型腸桿菌(EerobacteriaceaSTX2)試劑盒20次
ELISAKitHIS大鼠組胺
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit ELISA
兔骨保護素(OPG)ELISAKIT ELISA
兔胰淀素(Amylin)ELISAKit ELISA
兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA
Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys64) antibody
異戊烯半胱羧基甲基轉(zhuǎn)移酶抗體
IL13RA2重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8 0.5mgCDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原
SLITRK4重組人 SLITRK4 / Slitrk4 蛋白 Protein
HSPA1A Protein Human 重組人 HSP70 / HSPA1A 蛋白
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白
CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8 0.5mgCDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原
HSPA1A Protein Human 重組人 HSP70 / HSPA1A 蛋白
IL13RA2重組小鼠 IL13RA2 / CD213A2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白
SLITRK4重組人 SLITRK4 / Slitrk4 蛋白 Protein
大鼠小腦顆粒細(xì)胞小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠K1(VK1)試劑盒
Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰受體抗體(AChRab)pcr檢測試劑盒分裝
Humancommonacelymphocyticleukaemiaaigen,CALLA試劑盒人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織AURORA-C激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPyridinolinecrosslinks,PYDELISAKit人膠原交聯(lián)(PYD)試劑盒規(guī)格:96T/48T