細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞簡介：
大鼠嗅球神經(jīng)元分離自嗅球組織；嗅球是脊椎動(dòng)物前腦結(jié)構(gòu)中參與嗅覺的部分，用于感知?dú)馕丁Ｐ崆蚍譃槎€(gè)不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細(xì)胞的神經(jīng)纖維纏集在一起，形成線球狀的部分。在這里，纖維與多個(gè)次級(jí)神經(jīng)元——僧帽細(xì)胞的樹突相連接，進(jìn)而由這里伸出神經(jīng)纖維形成嗅囊，終止于額葉下方。一般認(rèn)為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動(dòng)物而言，嗅球位在大腦的前面，不過人的嗅球位于大腦的內(nèi)部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護(hù)嗅球，哺乳動(dòng)物的篩板會(huì)分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神經(jīng)會(huì)穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個(gè)不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 嗅球組織 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7576 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒 ，英文名： BMPs ELISA Kit
Rabbit E selectin (E-Selectin/CD62E) ELISA Kit 兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒
莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-10ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitT4犬甲狀腺素
乙酰丁香 100mg
Acetosyringone 1g
香草 25g
Acetovanillone 50g
白細(xì)胞介素1δ抗體
羊雌三醇(E3)ELISA 試劑盒
Human ai phosphatidyl serine aibody (APSA) ELISA Kit 人抗0脂酰絲抗體(APSA)試劑盒
HumanVitaminD,VDELISAKit 人D(VD)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforADAM9(HumanADisiegrinAndMetalloprotease9)ELISAKit人解整合素樣金屬蛋白酶9
血液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量試劑盒20次
Mousepyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit小鼠交聯(lián)物(PY)試劑盒
原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體
ERBB2重組小鼠 HER2 / ErbB2 / CD340 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
C-型凝集素域家族2成員C(CLEC2C)重組蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C)
GBP2重組人 GBP-2 / GBP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CA5A Protein Human 重組人 CA5A / CA-VA 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICAM1 Protein Rat 重組大鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞V-Myc骨髓細(xì)胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)重組蛋白 Recombinant V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog (MYC)
CA5A Protein Human 重組人 CA5A / CA-VA 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LIF重組小鼠 LIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL18R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL18R1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
STC2重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
